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商品屬性：

產品名稱：小鼠小梁網細胞

組織來源：眼組織

產品規(guī)格：25cm2培養(yǎng)瓶/5×105cells

細胞簡介：

小鼠小梁網細胞分離自眼組織；小梁網是一個多孔的環(huán)形帶，由相互連接的通道組成，位于眼睛前面的透明窗口、角膜和眼睛的有色部分虹膜之間的交叉處。橫跨眼睛前房的角度，小梁網是眼內液體排出的主要部位，眼睛內的液體，被稱為房水，通過眼的結構，通過周圍的小梁網流出，進入一系列管內，統(tǒng)稱為Schlemm管。阻塞可導致眼壓由于眼睛內液體的積聚而增加的眼壓。

本公司生產的小鼠小梁網細胞采用酶液消化法制備而來，細胞總量約為5×105cells，細胞經NSE免疫熒光鑒定，細胞純度可達80%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5、培養(yǎng)基信息：

培養(yǎng)基內容：MSCM基礎培養(yǎng)基、FBS、Penicillin、Streptomycin等；

我們推薦使用CTCC小鼠小梁網細胞專用培養(yǎng)基作為體外培養(yǎng)小鼠小梁網細胞專用培養(yǎng)基。

注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件;建議使用完全培養(yǎng)基。
4. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)。
5. 該細胞只能用于科研。
細胞培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。 天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。 
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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