抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,聯(lián)祖通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量 時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采血,家兔、山羊、綿羊可采用采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
別 名 chm II; chm2; Chondromodulin II; hLECT2; LECT 2; LECT-2; LECT2; LECT2_HUMAN; Leukocyte cell derived chemotaxin 2; Leukocyte cell-derived chemotaxin-2; MGC126628.
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
產(chǎn)品名稱
|
白細(xì)胞細(xì)胞化學(xué)吸引素2抗體0.2ml/200μg
|
英文名稱
|
Anti-LECT2
|
貨號
|
LZK63852
|
英文名稱 Anti-LECT2
中文名稱 白細(xì)胞細(xì)胞化學(xué)吸引素2抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 16kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human LECT2
亞 型 IgG
免疫熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其完全覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強度。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
人腎系膜細(xì)胞cDNA 規(guī)格:20mg 英文名稱Human ICAM-2/sCD102 ELISA Kit
人膀胱平滑肌細(xì)胞cDNA 規(guī)格:20mg 英文名稱Human Intercellular adhesion molecular 1 ELISA KIT
人尿道上皮細(xì)胞cDNA 規(guī)格:20mg 英文名稱Human Motilin ELISA Kit
人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞cDNA 規(guī)格:20mg 英文名稱Human Vitamin D Receptor ELISA Kit
人上皮細(xì)胞cDNA 規(guī)格:20mg 英文名稱Human Vitamin C ELISA Kit
人成纖維細(xì)胞cDNA 規(guī)格:20mg 英文名稱Human Vitamin B6 ELISA Kit
人平滑肌細(xì)胞cDNA 規(guī)格:20mg 英文名稱Human microalbunminuria ELISA KIT
人顱骨造骨細(xì)胞cDNA 規(guī)格:20mg 英文名稱Human AOPP ELISA Kit
人滑膜細(xì)胞cDNA 規(guī)格:20mg 英文名稱Human DPD ELISA Kit
人髓核細(xì)胞cDNA 規(guī)格:20mg 英文名稱Human DHEA-S-7 ELISA Kit
人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞cDNA 規(guī)格:100mg 英文名稱Human DHEA ELISA Kit
人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞cDNA 規(guī)格:20mg 英文名稱Human Melatonin ELISA Kit
人肝細(xì)胞cDNA 規(guī)格:20mg 英文名稱Human Ceruloplasmin (CP) ELISA Kit
人肝臟星形細(xì)胞cDNA 規(guī)格: 英文名稱Human HCY ELISA Kit
*微內(nèi)皮細(xì)胞cDNA 規(guī)格:10mg 英文名稱Human Glycogen phosphorylase MM ELISA Kit
人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體ssDNA定量檢測試劑盒 免疫測定
豬層連蛋白/板層素LN定量檢測試劑盒 免疫測定
豬白介素5IL5定量檢測試劑盒 免疫測定
人抗α胞襯蛋白抗體IgG/IgAαFodrinIgG/IgA定量檢測試劑盒 免疫測定
豬孕激素/孕PROG定量檢測試劑盒 免疫測定
人抗蛋白酶3抗體IgGPR3AbIgG定量檢測試劑盒 免疫測定
小鼠促生長激素釋放激素(GRH)試劑盒,ELISA分析檢測試劑盒 Mouse GRH ELISA Kit
小鼠中性粒細(xì)胞趨蛋白2(GCP2)試劑盒,ELISA分析檢測試劑盒 Mouse GCP2 ELISA Kit
小鼠BTC ELISA Kit Mouse BTC ELISA Kit
小鼠生長素(Angiogenin)試劑盒,ELISA分析檢測試劑盒 Mouse Angiogenin ELISA Kit
白細(xì)胞細(xì)胞化學(xué)吸引素2抗體0.2ml/200μg小鼠環(huán)腺苷(cAMP)試劑盒,ELISA分析檢測試劑盒 Mouse cAMP ELISA Kit
小鼠巨噬細(xì)胞移動抑制子(MIF)試劑盒,ELISA分析檢測試劑盒ELISA Kit Mouse Macrophage MigRation Inhibitory Factor ELISA Kit
小鼠孕激素(Progesterone)試劑盒,ELISA分析檢測試劑盒 Mouse Progesterone ELISA kit