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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。

細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞株；20F8

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性: 懸浮生長(zhǎng)

特征特性: 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

N-芴甲氧羰基-N'-甲磺?；?L-精氨酸，25g　進(jìn)口/原裝 Dovitinib　規(guī)格：>99%,BR

N-芴甲氧羰基-N'-甲磺?；?L-精氨酸，5g　進(jìn)口/原裝 Dotriacontane　規(guī)格：standard for GC,≥98.0%(GC)

其他生化試劑，　進(jìn)口/原裝 Dorzolamide intermediate　規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口"

十二烷(同分異構(gòu)體混合物)，500ml　進(jìn)口/原裝Dorzolamide HCl　規(guī)格：>99%,USP31

1-戊硫醇，5ml　進(jìn)口/原裝 Dorzolamide HCl　規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

1-戊硫醇，500ml　進(jìn)口/原裝 Dorsomorphin 2HCl;BML275.HCL;Compound C　規(guī)格：>98%,AMPK選擇性抑制劑

1-戊硫醇，25ml　進(jìn)口/原裝 D-Ornithine monohydrochloride　規(guī)格：>98%,BR

1-戊硫醇，100ml　進(jìn)口/原裝 Doripenem 　規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品,一水合物

DL-丙氨酸，500g　進(jìn)口/原裝 Doripenem 　規(guī)格：>99%,BR,一水合物

酰芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 規(guī)格：供檢查用 D-GALACTOSE 1-[2-(2-AZIDOETHOXY)ETHOXYETHYL]-2,3,4,6-TETRA-O-ACETATE

?；宙邏A(PKC-412) 規(guī)格：HPLC含量測(cè)定 Clemastine fumarate

酰次烏頭原堿（標(biāo)準(zhǔn)品） 規(guī)格：>98%,BR Clemastine fumarate

酰(>98%,BR) 規(guī)格：含量測(cè)定 Ketotifen fumarate

酮(>99.0%(GC)) 規(guī)格：供檢查用 2-Oxohexamethylenimine

醛（標(biāo)準(zhǔn)品） 規(guī)格：含量測(cè)定 Benproperine phosphate

基橙(>95.0%(W)) 規(guī)格：含量測(cè)定 Minoxidil

磺酸鈉(>98%，BR) 規(guī)格：≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品 7-Hydroxy-4-methylcoumarin

磺酸貝托司汀 規(guī)格：≥97%,BR 7-Hydroxy-4-methylcoumarin

磺酸氨地平（絡(luò)活喜、安洛地） 規(guī)格：含量測(cè)定 Testosterone undecanoate
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；20F8價(jià)格De-O-methylacetovanillochromene二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  分子式：C29H50O2  性狀：Powder  純度：93.0%

Encecalin二氫楊梅素  分子式：C28H46O  性狀：Powder  純度：96.0%

4-Hydroxybenzyl alcohol二氫楊梅素(標(biāo)準(zhǔn)品)  分子式：C29H48O2  性狀：Powder  純度：%

2,4,6-Trimethoxyphenol glucoside番瀉苷A（標(biāo)準(zhǔn)品）  分子式：C29H50O3  性狀：Powder  純度：93.0%

4-(3,4-Dihydroxyphenyl)-2-butanone番瀉苷B（標(biāo)準(zhǔn)品）  分子式：C45H80O2  性狀：Powder  純度：90.0%

2,4-Dihydroxy-6-methoxyacetophenone防己諾林堿（標(biāo)準(zhǔn)品）  分子式：C35H56O6  性狀：Powder  純度：%

4-Hydroxybenzoic acid粉防己堿;漢防己甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)  分子式：C29H46O  性狀：Powder  純度：94.0%

Resveratrol佛手柑內(nèi)酯  分子式：C29H52O3  性狀：Powder  純度：96.5%

Viniferol D甘草次酸(α型),18alpha-甘草次酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  分子式：C29H50O2  性狀：Powder  純度：95.0%