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特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞株；K3L25

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性: 懸浮生長(zhǎng)

特征特性: 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。

3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
綿羊血清（無(wú)菌過(guò)濾）生長(zhǎng)特性：貼壁培養(yǎng)特征特性：廣譜角蛋白（PCK）或細(xì)胞角蛋白-19（CK-19）免疫熒光染色為陽(yáng)性。經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%

脫纖維馬血（無(wú)菌）復(fù)蘇細(xì)胞步驟：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。*天換液并檢查細(xì)胞密度。細(xì)胞傳代步驟：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

雞血清（無(wú)菌過(guò)濾）生長(zhǎng)特性：貼壁培養(yǎng)特征特性：結(jié)蛋白（Desmin)或者平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）免疫熒光染色為陽(yáng)性

昆蟲SF9細(xì)胞專用血清生長(zhǎng)特性：貼壁培養(yǎng)特征特性：廣譜角蛋白（PCK）或細(xì)胞角蛋白-19（CK-19）免疫熒光染色為陽(yáng)性。經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%

四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)專用胎牛血清生長(zhǎng)特性：貼壁培養(yǎng)特征特性：假性因子（vWF）免疫熒光染色為陽(yáng)性

抗凝綿羊血（無(wú)菌）生長(zhǎng)特性：貼壁培養(yǎng)特征特性：結(jié)蛋白（Desmin)或者平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）免疫熒光染色為陽(yáng)性

細(xì)胞融合專用胎牛血清特征特性：抗原表達(dá): CD31 陽(yáng)性 [PubMed:1315100] 產(chǎn)物: 八因子 [PubMed: 11315100]; 整合唾液酸蛋白 (BSP) [PubMed11315100]; biglyan [PubMed: 11315100]; decorrin [PubMed:1315100]; villin 2 (ezrin) [PubMed: 11325848]. 骨唾液酸蛋白, biglyan, decorrin, 和 osteopontin 的表達(dá)顯示其骨家族細(xì)胞特性。 在本庫(kù)通過(guò)支原體檢測(cè)。細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。

抗凝新生牛血（無(wú)菌）生長(zhǎng)特性：貼壁培養(yǎng)特征特性：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫熒光染色為陽(yáng)性

綿羊紅細(xì)胞6%（無(wú)菌）生長(zhǎng)特性：貼壁培養(yǎng)特征特性：假性因子（vWF）免疫熒光染色為陽(yáng)性該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。

VERO細(xì)胞專用血清生長(zhǎng)特性：貼壁培養(yǎng)特征特性：細(xì)胞角蛋白-8（CK-8）免疫熒光染色為陽(yáng)性，經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%

抗凝山羊血（無(wú)菌）生長(zhǎng)特性：貼壁培養(yǎng)特征特性：CD44免疫熒光染色為陽(yáng)性。細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因

脫纖維新生牛血（無(wú)菌）細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。培養(yǎng)條件：準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，15%；L-Glu，1%；NEAA，1%；丙酮酸鈉，1%； 添加1uL/mLβ-Me和0.1uL/mLLIF； 雙抗，1%；培養(yǎng)瓶用0.1%明膠包被，或者使用昆明白MEF作為飼養(yǎng)層細(xì)胞。

抗凝驢血（無(wú)菌）生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。

二倍體細(xì)胞專用胎牛血清復(fù)蘇細(xì)胞步驟：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。*天換液并檢查細(xì)胞密度。細(xì)胞傳代步驟：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

巴比西鼠血清（無(wú)菌過(guò)濾）生長(zhǎng)特性：貼壁培養(yǎng)特征特性：骨骼肌細(xì)胞是人和動(dòng)物體內(nèi)*的細(xì)胞之一，它們是由成肌細(xì)胞(Myoblasts)融合而來(lái)的多核細(xì)胞，故骨骼肌的形成是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程，并需要多種細(xì)胞信號(hào)通路的參與，包括phosphatidylinositol 3-kinase，calcineurin，STAT3和MAPK等。原代骨骼肌細(xì)胞的培養(yǎng)是研究細(xì)胞分化過(guò)程的有效的模型。

γ照射處理胎牛血清培養(yǎng)條件：DMEM培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗1%傳代方法：1:2到1:5的比例

狗血清（無(wú)菌過(guò)濾）復(fù)蘇細(xì)胞步驟：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。*天換液并檢查細(xì)胞密度。細(xì)胞傳代步驟：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

脫纖維驢血（無(wú)菌）生長(zhǎng)特性：貼壁特征特性：This cell line may be used for both in vitro and in vivo studies of a rat brain tumor. It grows well in cellculture and provides a simple,reproducible glioma model when inoculated into the brains ofsyngeneic rats.The RG2 and F98 (ATCC CRL-2397) gliomas can be used as rat brain tumor models inexperimental neuro-oncology.

細(xì)胞生物學(xué)>細(xì)胞培養(yǎng)基復(fù)蘇細(xì)胞步驟：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。*天換液并檢查細(xì)胞密度。細(xì)胞傳代步驟：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

DMEM(H)(含雙抗，不含丙酮酸鈉)復(fù)蘇細(xì)胞步驟：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。*天換液并檢查細(xì)胞密度。細(xì)胞傳代步驟：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
雜交瘤細(xì)胞株；K3L25供應(yīng)商CD4 Others Human  CD4 / LEU3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7

NCF2 Others Human  NCF-2 / NCF2 / P67phox 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

獼猴皮膚細(xì)胞;MMS4 軟組織細(xì)胞，TE 115.T細(xì)胞 Eca-109(細(xì)胞)

小細(xì)胞細(xì)胞;NCI-H209

小氣道上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

Phospho-HP1(Tyr43)  異染色質(zhì)蛋白1磷酸化抗體（果蠅）規(guī)格： 1ml

HPL/PL  胎盤泌乳素抗體規(guī)格： 0.2ml

HPR1/p84  核基質(zhì)p84蛋白抗體規(guī)格： 0.2ml

HPV  類狀瘤病毒抗體規(guī)格： 0.2ml

HPV16-E6  類狀瘤病毒16抗體規(guī)格： 0.1ml