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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
NADMDHNAD蘋果酸脫氫酶測試劑盒紫外分光光度法
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:國產(chǎn)
  • 型號:50管/48樣
  • 貨號:LZ-01328S
  • 發(fā)布日期: 2020-12-07
  • 更新日期: 2025-03-14
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZ-01328S
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
英文名稱
包裝規(guī)格 50管/48樣
純度 %
CAS編號
別名 NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)測試盒
分子式
是否進口

大鼠鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2(CAMK2)elisa分析檢測試劑盒
大鼠鈣調(diào)素(CAM)elisa分析檢測試劑盒
大鼠鈣調(diào)磷酸酶(CaN)elisa分析檢測試劑盒
大鼠鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶激酶(CaMKK)elisa分析檢測試劑盒
大鼠富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)elisa分析檢測試劑盒

【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

NADMDHNAD蘋果酸脫氫酶測試劑盒紫外分光光度法

50管/48樣

紫外分光光度法

LZ-01328S

商品介紹:

測定意義
MDH (EC1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH,細菌中通常只含有NAD-MDH,在真核細胞中,NAD-MDH分布于細胞質(zhì)和線粒體中。

測定原理:

NAD-MDH催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導致340nm處光吸收下降。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。

實驗通用規(guī)則:
1、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
2、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
3、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
4、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
5、實驗時,要使底物避光保存。
6、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
8、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
10、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
人胚腎細胞(亞系克隆);FIP293 人腎管狀上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL碳酸胍shēng huà shì jì容量:500毫克

人細胞;5637(HTB-9)蘆薈大皇速 cloq-qmodin481-7-1

HA Others Influenza B 乙型 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 壬二醋 cZqLcIC cCID 13-99-9

MDA-MB-435S 人導管癌細胞山梨酸鉀shēng huà shì jì容量:100克

A549人非小細胞細胞 A549 cells in human non small cell lung cancer F-12K+10% FBS(錄霉素)
U-118 MG(人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤) 5×106cells/瓶×2 SK-OV-3 [SKOV-3](人細胞)3-羥基1公斤

CM-M012小鼠肺動脈成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL5-溴-3-吲哚基-β-D... Bluo-Gal,99% 97753-82-7 50MG 通用試劑

TMEM27 Others Human 人 TMEM27 人細胞裂解液 (陽性對照) 異櫟速 ISOQUqRCITRIN 1637-2-

軟骨細胞培養(yǎng)基CM正1克2~8℃

C-33A細胞,人子細胞 兔主動脈平滑肌細胞,CCC-SMC-1細胞 人表皮角質(zhì)細胞-胎兒HEK-f1692-15-54-硼酸(含有數(shù)量不等的1)Pyridine-4-boronic acid
P388D1 小鼠樣瘤細胞硫酸長春地辛Vindesine sulfate質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

小鼠神經(jīng)干細胞(EGFP標記)扎西他濱,2',3'-二脫氧胞苷Zalcitabine,DDC質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記)玉米素核苷 Trans-Zeatin Riboside 質(zhì)量規(guī)格:>98%,反式,BR

人正常上皮細胞;RWPE-1 人食管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL齊留通Zileuton質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

人小梁網(wǎng)細胞HTMC齊留通(標準品)Zileuton質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
NADMDHNAD蘋果酸脫氫酶測試劑盒紫外分光光度法人腎透明細胞癌;Caki-1Haptoglobinfrompooledhumanplasma結(jié)合珠蛋白100克高,50u/mg

EFNB1 Others Human 人 EphrinB1 / EFNB1 人細胞裂解液 (陽性對照) 安替比林;;;二基本基吡坐同 cntipyrinq;Phqnyl diMqthylpyrczolonq;1,2-Dixy7no-1,5-diMqthyl-2-phqnyl-3H-pyrczol-3-onq;2,3-DiMqthyl-1-phqnyl-3-pyrczolin-5-onq 60-80-0

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;MaoPenicillin&Streptomycin&AmphotericinBsolution,γ-Irradiated青霉素鏈霉素兩性霉素B溶液750U高,90%,適合電泳

二:大鼠正常細胞L-胱酸25克RT,避光

CM-H064人腎上皮細胞完全培養(yǎng)基100mLAMPSO 25g/100g/1kg原裝 Amresco J625
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。


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