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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4133
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-03-14
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4133 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
乳突類圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 | Strongyloides papillosus | LZR4133 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
大腸埃希菌Sheep 6-OHDA (6-Hydroxydopamine) ELISA Kit拉丁屬名: coli
玫瑰庫克氏菌Sheep LRP6 (Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Kocuria rosea
杰丁畢赤酵母Sheep MMP-13 (Matrix Metalloproteinase 13) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
季也蒙有孢漢遜酵母Sheep TSTA (Tumor Specific Transplantation Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Hanseniaspora guilliermondii
異常威克漢姆酵母Sheep OSMR (Oncostatin M Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Wickerhamomyces anomalus
蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種Sheep CA1 (Carbonic Anhydrase I) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus thuringiensis subsp. galleriae
費(fèi)雷生刺枝霉Sheep AGPA (Anti-Glucoprotein 210 Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetostylum fresenii
乳酒假絲酵母Sheep PHSA (Poly Serium Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Candida kefyr
大腸埃希氏桿菌Sheep HSP-40 (Heat Shock Protein 40) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
抗生鏈霉菌Sheep DEFβ2 (Defensin Beta 2) ELISA Kit用途: 拮抗菌
糞腸球菌Sheep STAT3 (Signal Transducer and Activator of Transcription 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Enterococcus faecalis
尖孢鐮刀菌Sheep MMP-9 (Matrix Metalloproteinase 9) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
阪崎腸桿菌Sheep LT-E4 (Leukotriene E4) ELISA Kit拉丁屬名: Enterobacter sakazakii
苜蓿中華根瘤菌Sheep DMD (Dystrophin) ELISA Kit用途: 與苜蓿結(jié)瘤固氮效果很好
*擬蛹蟲草Sheep LIPF (Lipase, Gastric) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
乳突類圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒 英文名稱:Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor,PLAUR/uPAR ELISA Kit 特價促銷
兔凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒英文名稱:Rabbit prothrombin fragment 1+2,F1+2 ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
IL-5 大鼠白介素-5Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-DDAH-II 雙甲基精氨酸水解酶2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NEGR1 神經(jīng)生長調(diào)節(jié)蛋白1 規(guī)格 0.2ml
Human advanced oxidation protein products,AOPP ELISA Kit 人晚期氧化蛋白產(chǎn)物 96T
TTBK2 英文名稱: Tau微管蛋白激酶2 0.2ml
CCDC46 英文名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白46 0.2ml
Anti-P21/CDKN1A p21蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
PTK/CD115(Human protein tyrosine kinase) ELISA Kit 人蛋白酪氨酸激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-NOS-2/iNOS 一氧化氮合成酶-2(誘導(dǎo)型)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IKK beta/IKB KB抑制蛋白激酶β 規(guī)格 0.1ml
IL-16 ELISA KIT 大鼠白介素16 96T
PI 3 Kinase p85 beta 英文名稱: 磷脂酰肌醇激酶p85β 0.1ml
Galectin-3(human) 人半乳糖凝集素-3Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CPSF4/CPSF30 剪切和多聚腺苷酸化特異性因子4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NMDA-NR1/NR1/NMDAR1 天冬氨酸受體 規(guī)格 0.1ml
Human Gliadin IgA ELISA Kit 人蛋白IgA 96T
TRAP1 英文名稱: 熱休克蛋白75 0.2ml
CSGLCAT 英文名稱: 軟骨素聚合酶3 0.2ml
Anti-CPSF4/CPSF30 剪切和多聚腺苷酸化特異性因子4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Collagen VI alpha 1 英文名稱: 抗Ⅵ型膠原 0.1ml
Anti-IL-13 白介素13Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
AHA(Human anti-Histone antibody) ELISA Kit 人抗組蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-IL-21 白介素21Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LRSAM1 LRSAM1蛋白 規(guī)格 0.2ml
FABP(Human fatty acid-binding protein) ELISA Kit 人脂肪酸結(jié)合蛋白 96T
phospho-ROCK2(Tyr256) 英文名稱: 磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶2 0.1ml