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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

魯氏接合酵母拉丁屬名: Zygosaccharomyces  rouxii

日本曲霉拉丁屬名: Aspergillus japonicus

豬絲菌拉丁屬名: rhuriopathiae

大腸桿菌屬拉丁屬名: Escherichia  coli

聚生殼菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

球孢白僵菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

四川散斑殼注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

居真菌細菌拉丁屬名: Mycetocola sp.

球孢白僵菌拉丁屬名: Beauveria bassiana

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

南極假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas antarctica

新疆鹽地桿菌拉丁屬名: Salinibacterium xinjiangense

凝結(jié)芽胞桿菌拉丁屬名: Bacillus  coagulans

印度洋斯塔普氏菌拉丁屬名: Stappia indica
芹菜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應商山羊抗小鼠 IgG(H+L)/AP 0.1ml 美國Jackson公司分裝

VSV-G tag 英文名稱： VSV-G tag標簽 0.1ml

DLST 英文名稱： DLST蛋白 0.2ml

Anti-Apollon/BIRC6 Apollon凋亡抑制蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

ERK4 英文名稱： 原活化蛋白激酶4 0.1ml

神經(jīng)生長因子受體 Anti-NGF-R/p75NTR/CD271 0.1ml

Anti-phospho-SHC (Tyr317)/FITC 熒光素標記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CD80 英文名稱： CD80 0.2ml

Anti-HSP22 熱休克蛋白-22Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Human CA724 ELISA Kit 人標志物Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-HGF 肝細胞生長因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MHC class I 組織相容性復合體1多肽 規(guī)格 0.1ml

PTP/PTPase/CD148(Human protein tyrosine phosphatase) ELISA Kit 人蛋白酪酸磷酸酶 96T

RIT1 英文名稱： RIT1蛋白 0.2ml

cellulase 英文名稱： 纖維素酶 1ml

Anti-CD14 內(nèi)毒素受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

小鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse deoxypyridinoline,DPD ELISA Kit進口/原裝

小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit 進口/原裝

小鼠網(wǎng)膜素(omentin)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse omentin ELISA Kit特價促銷

小鼠維生素B6(VB6)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Vitamin B6,VB6 ELISA Kit特價供應

小鼠維生素C(VC)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Vitamin C,VC ELISA Kit進口/原裝

CX3CR1 英文名稱： 趨化因子受體1 0.1ml

Anti-IL1RAPL1 白介素1受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

LKM(Human liver kidney microsome autoantibody) ELISA Kit 人抗肝腎微粒體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-IL-29/IFNL1 白細胞介素29Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh LRRC2 LRRC2蛋白 規(guī)格 0.2ml

VMA(Human vanillylmandelic acid) ELISA Kit 人垂草扁桃酸 96T

phospho-RPS6KB1(Ser427) 英文名稱： 磷酸化核糖體S6蛋白激酶 0.1ml