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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4304
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-03-14
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4304 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
綿羊源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商 | 50T | LZR4304 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
摩氏摩根菌拉丁屬名: Morganella morganii subsp. morganii
葡萄座腔菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
華根霉拉丁屬名: Rhizopus chinensis
乙假絲酵母拉丁屬名: Candida ethanolica
水生拉恩氏菌拉丁屬名: Rahnella aquatilis
根瘤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
解蛋白弧菌拉丁屬名: Vibrio proteolyticus
Lonsdalea quercina subsp. quercina注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
德曼鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces demainii
康寧木霉拉丁屬名: Trichoderma koningii
橄欖色青霉拉丁屬名: Penicillium olivicolor
巴氏醋桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
刺盤(pán)孢屬拉丁屬名: Colletotrichum sp.
香菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
泡盛曲霉拉丁屬名: Aspergillus awamori
綿羊源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒供應(yīng)商phospho-Caspase 6 (Ser257) 英文名稱(chēng)： 磷酸化半胱胺酸蛋白酶蛋白6 0.1ml
Anti-C-jun 原癌基因蛋白/活化蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
ATGA/TGAB(Human Anti-Thyroid Microsome Antibody) ELISA KIT 人抗甲狀腺球蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-IL-6R Beta/CD130/gp130 白細(xì)胞介素6受體βMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh LPL/PLASTIN2 脂蛋白脂酶 規(guī)格 0.1ml
Apo-H(Human Apolipoprotein H) ELISA Kit 人載脂蛋白H 96T
TIG2 英文名稱(chēng)： 視黃酸受體應(yīng)答蛋白2 0.1ml
CD7 英文名稱(chēng)： CD7 0.1ml
Anti-Phospho-NFKB p65 (Ser468) 磷酸化細(xì)胞核因子NF-κB p65Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
WARS(Human tryptophanyl-tRNA synthetase) ELISA Kit 人色氨酰tRNA合成酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MTNR1B 褪黑素受體1BMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Insig2 誘導(dǎo)基因2 規(guī)格 0.1ml
Beta2-GP1 Ab IgM(Human Beta2-Glycoprotein 1 Antibody IgM) ELISA Kit 人β2糖蛋白1IgM 96T
Phospho-PAK1(Ser199 + Ser204) + PAK2 (Ser192 + Ser197) 英文名稱(chēng)： 磷酸化p21激活激酶1/2 0.1ml
ARL11 英文名稱(chēng)： ADP核糖基化因子樣11 0.2ml
Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser33/37) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化β 連環(huán)素蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
IL-11 ELISA Kit 大鼠白介素11Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-AP2 alpha/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄激活蛋白2αIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM82A1 微管動(dòng)力調(diào)節(jié)蛋白FAM82A 規(guī)格 0.2ml
MIS/AMH)ELISA Kit 大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素 96T
Mitochondrial ribosomal protein L11 英文名稱(chēng)： 線粒體核糖體蛋白L11 0.2ml
Cux2 英文名稱(chēng)： 轉(zhuǎn)錄同源蛋白質(zhì)CUX2 0.1ml
Anti-Kiss-1 轉(zhuǎn)移抑制基因Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
SIgA(Human secretory immunoglobulin A) ELISA Kit 人分泌型免疫球蛋白A(人唾液)Multi-class antibodies規(guī)格： 96T
Anti-RAR Beta 維甲酸受體βMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh H9N1 Hemagglutinin A型病毒H9N1血凝素型 規(guī)格 1ml
Lp-PL-A2 ELISA Kit 大鼠脂蛋白磷脂酶A2 96T
PAGE4 英文名稱(chēng)： 相關(guān)蛋白4 0.2ml
