|
- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4262
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-03-14
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4262 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
螺源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | LZR4262 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
蹄形干酪菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
產(chǎn)水鏈霉菌拉丁屬名: Xanthobacter tagetidis
棉子糖腸球菌拉丁屬名: Enterococcus raffinosus
雅致小克銀漢霉拉丁屬名: Cunninghamella elegans
雅致放射毛霉拉丁屬名: Actinomucor elegans
科羅拉多擬無枝酸菌拉丁屬名: Amycolatopsis coloradensis
杰丁塞伯林德納氏酵母拉丁屬名: Cyberlindnera jadini
美澳型核果褐腐病菌拉丁屬名: Monilinia fructicola
婁地青霉拉丁屬名: Penicillium roqueforti
少孢節(jié)叢孢拉丁屬名: Arthrobotrys oligospora
大腸埃希菌拉丁屬名: coli
果生鏈核盤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
微球菌拉丁屬名: Micrococcus sp.
美極梅奇酵母拉丁屬名: Metschnikowia pulcherrima
剛第弓形蟲拉丁屬名: gondii
螺源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格人Salusin-α ELISA試劑盒英文名稱：Human Salusin α ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA試劑盒英文名稱：Human SH2-containing protein,SHC/SLP-76 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 樣生長(zhǎng)因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-ACEI 緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-CDKN2A/P16 (Ser152) 磷酸化基因p16 規(guī)格 0.1ml
人血清IgA液體(70-80%) 10mg 國(guó)產(chǎn)
WAVE 1 英文名稱： 富含脯酸同源蛋白1 0.2ml
CD36 英文名稱： CD36 0.1ml
Anti-HRH3/GPCR97 組織胺H3受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
PA-IgG/M/A(Human platelet antibodies IgG/M/A) ELISA Kit 人抗血小板IgG/M/AMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-IL-8/CXCL8 (mouse, rat) 白介素8 (小鼠，大鼠)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Lpin1 protein Lpin1 規(guī)格 0.2ml
Hyl(Human hydroxylysine) ELISA Kit 人羥賴酸 96T
RNF126 英文名稱： 環(huán)指蛋白126 0.2ml
phospho-DAXX (Ser668) 英文名稱： 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白 0.1ml
ADAM15 ADAM15 鼠單抗 (PE) Human
ELF1 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子ELF1 0.2ml
生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因3 Anti-TSARG3 0.2ml
Anti-TREML1/TLT1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IRS1(Ser1101) 磷酸化受體底物-1 規(guī)格 0.1ml
Secretin receptor 分泌素受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
CST8 英文名稱： 胱抑素8/半胱酸蛋白酶抑制劑8 0.2ml
Anti-FAK2/Pyk2 富含脯氨酸的酪氨酸激酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Cytochrome-C 大鼠細(xì)胞色素CMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-beta endorphin β-內(nèi)啡肽Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Musashi 1/Msi1 神經(jīng)干細(xì)胞RNA結(jié)合蛋白Musashi1 規(guī)格 0.2ml
PAIg(Human platelet-associated immunoglobulins) ELISA Kit 人血小板相關(guān)免疫球蛋白 96T
SEC14 like protein 2 英文名稱： SEC14樣蛋白2 0.2ml
