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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

白僵菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

玫瑰庫克氏菌拉丁屬名: Kocuria rosea

葉居菌拉丁屬名: Frondihabitans australicus

茶褐針層孔菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

豕鏈球菌拉丁屬名: Streptococcus porcinus

擬卵蓋鵝膏菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli

鐮刀菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

三葉草根瘤菌用途: 與三葉草共生固氮

Chitinophaga pinensis拉丁屬名: Chitinophaga pinensis

墨西哥假黃單胞菌拉丁屬名: Pseudoxanthomonas  mexicana

膠孢拉丁屬名: Glomerella cingulata

居成團玫瑰變色菌拉丁屬名: Roseovarius nubinhibens

豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS24規(guī)格: 0.5ml

栗酒裂殖酵母拉丁屬名: Schizosaccharomyces pombe
副溶血性弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Agpat2 英文名稱： 溶血磷脂酸?；D(zhuǎn)移酶β 0.2ml

Anti-VDCC-L alpha L-型電壓依賴型鈣通道αMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Human ox-LDL ELISA Kit 人氧化Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-SSTR3 生長抑素受體3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat anti-human IgM whole serum 羊抗人IgM抗血清 規(guī)格 1ml

CETP ELISA Kit 大鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白 96T

NANOGP8 英文名稱： 干細胞轉(zhuǎn)錄因子NANOGP8 0.2ml

CD239 英文名稱： B細胞粘附分子CD239 0.2ml

Anti-NTCP 鈉離子/磺膽酸共轉(zhuǎn)運蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

DPP IV (Human dipeptidyl peptldase IV ) ELISA Kit 人二肽基肽酶ⅣMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-MT-ND1 NADH復(fù)合體1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh IFN-Alpha 2b/Interferon alpha 2/INFA2 干擾素α2b 規(guī)格 0.1ml

TRAb(Mouse thyroid stimulating hormone receptor antidoby)ELISA Kit 小鼠抗促甲狀腺素受體 96T

PGC1 alpha + beta 英文名稱： 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α+β 0.1ml

人熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒英文名稱：Human heat shock protein 27，HSP-27 ELISA Kit特價供應(yīng)

人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒英文名稱：Human Heat Shock Protein 40，HSP-40 ELISA Kit特價供應(yīng)

人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒英文名稱：Human Heat Shock Protein 60，HSP-60 ELISA Kit進口/分裝

人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒英文名稱：Human Heat Shock Protein 70，HSP-70 ELISA Kit特價促銷

人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒英文名稱：Human Heat Shock Protein 90，HSP-90 ELISA Kit進口/原裝

RASSF1A(Ras association domain family 1A) Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Bax BaxMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

CROT 英文名稱： 過氧化物酶體肉堿?；D(zhuǎn)移酶 0.2ml

Anti-NT-3 神經(jīng)營養(yǎng)因子-3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

KLK 1(Human Kallikrein 1) ELISA Kit 人激肽釋放酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Myelin Protein Zero 外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh IMPDH1 肌苷單磷酸脫氫酶1 規(guī)格 0.2ml

PAL ELISA Kit 大鼠L苯丙酸解酶 96T

progesterone receptor 英文名稱： 孕激素受體 0.1ml