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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4206
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-03-14
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4206 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
亮熱厲螨探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | Tropiladaps clareae | LZR4206 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
球孢白僵菌PI (Proinsulin) ELISA Kit用途: 防治桃小食心蟲(chóng)
平滑針層孔菌GC (Glucagon) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
鮑氏志賀氏菌(現(xiàn)1)F-TESTO (Free Testoterone) ELISA Kit拉丁屬名: Shigella bogdii
西提亞橄欖形菌fT4 (Free Thyroxine) ELISA Kit拉丁屬名: Olivibacter sitiensis ??
托姆青霉fT3 (Free Triiodothyronine) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium thomii
鏈格孢f-Hb (Free Haemoglobin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
Rhodobacter johriiPg (Progesterone) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
牛鏈球菌TNF-β (Tumor Necrosis Factor Beta) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
根瘤菌EP (Erythrocyte Protoporphyrin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
水棲黃桿菌IL-24 (Interleukin 24) ELISA Kit拉丁屬名: Flavobacterium aquatile
白乳菇IFN-α (Interferon Alpha) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
梅林青霉Lactoferrin (LTF) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
微小桿菌拉丁屬名: Microvirga sp.
克魯斯假絲酵母ADP/Acrp30 (Adiponectin) ELISA Kit拉丁屬名: Candida krusei
英諾克李斯特氏菌MCP-1 (Monocyte Chemotactic Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Listeria innocua
亮熱厲螨探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒規(guī)格Rhesus antibody Rh phospho-P53(Ser33) 磷酸化抑制基因P53 規(guī)格 0.1ml
BNP 腦鈉素(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒英文名稱:Rat coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit進(jìn)口/分裝
大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒英文名稱:Rat coagulation factor Ⅲ,FⅢ ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
大鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒英文名稱:Rat coagulation factor Ⅷ related antigen,FⅧ-Ag ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
大鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒英文名稱:Rat coagulation factor Ⅹ,FⅩ ELISA Kit進(jìn)口/原裝
大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒英文名稱:Rat coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA Kit特價(jià)促銷
CD11b 英文名稱: 整合素αMIntegrin αM 0.1ml
Anti-ET-1 內(nèi)皮素-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
IL-21 大鼠白介素-21Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-DAP-5/p97 死亡相關(guān)蛋白5Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NDUFS4 線粒體復(fù)合物NDUFS4蛋白 規(guī)格 0.2ml
Human Tissue factor,IF ELISA Kit 人組織因子 96T
SGSH 英文名稱: 磺基葡糖胺酶 0.2ml
Anti-Phospho-CEBP alpha (Thr222/226) 磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse carcinoembryonic antign,CEA ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
小鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse interleukin 10,IL-10 ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
小鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Interleukin 11,IL-11 ELISA Kit 特價(jià)促銷
小鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Interleukin 13,IL-13 ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
TRBF1 (Telomeric repeat binding factor 1) 端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CQ028 英文名稱: 多癌基因下調(diào)蛋白 0.2ml
Anti-CGA 嗜鉻粒素AMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
IL-4 人白介素-4Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CG6856/CG6856-PA 果蠅CG6856-PAMulti-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
Rhesus antibody Rh NUPR1/p8 核蛋白p8 規(guī)格 0.2ml
Commassie Blue Fast Staining Solution 考馬斯亮藍(lán)快速染色液 70ml
phospho-TCF3 (Ser39) 英文名稱: 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子3 0.1ml