|
- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4161
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-03-14
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4161 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
東方泰勒蟲探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | Theileria orientalis | LZR4161 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
大腸埃希菌Sheep GDF9 (Growth Differentiation Factor 9) ELISA Kit 拉丁屬名: coli
癭青霉Sheep CA153 (Carbohydrate Antigen 153) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium fellutanum
膜醭假絲酵母Sheep PA-IgM (Platelet Associated Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Candida membranifaciens
香菇Sheep ADA (Adenosine Deaminase) ELISA Kit用途: 食用、藥用
芽孢桿菌Sheep SNCα (Synuclein Alpha) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
白色類諾卡氏菌Sheep EPOR (Erythropoietin Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Nocardioides albus
冷桿菌Sheep ANG II R1/AGTR1 (Angiotensin II Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Cryobacterium arcticum
棘抱曲霉Sheep CCL16 (Chemokine C-C-Motif Ligand 16) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus aculeatus
氨桿菌Sheep THRSP (Thyroid Hormone Responsive) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingobacterium wenxiniae
鹽索氏菌Sheep CHAc (Choline acetylase) ELISA Kit拉丁屬名: Thauera phenylacetica
植物乳桿菌Sheep GSP (Glycosylated Serum Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒素C型Sheep F8 (Coagulation Factor Ⅷ) ELISA Kit拉丁屬名: perfringens Type C
類布氏乳桿菌Sheep EK (Eepidermal Keratin) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus parabuchneri
球孢白僵菌Sheep PGD2S (Prostaglandin D2 Synthase, Brain) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
土壤球菌Sheep AGA (Anti-Glycolipid Antibody) ELISA Kit用途: 分類、研究，具有用作耐重金屬基因資源潛力。
東方泰勒蟲探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 ABHD4 英文名稱： α/β水解酶4 0.2ml
Anti-CD84/SLAMF5/FITC 熒光素標(biāo)記CD84IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
t-PA ELISA Kit 大鼠組織型纖溶酶原激活劑Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-ADNP/FITC 熒光素標(biāo)記活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FEN1 結(jié)構(gòu)特異性核酸酶FEN1 規(guī)格 0.2ml
ODF(Mouse osteoclast differentiation factor) ELISA Kit 小鼠破骨細(xì)胞分化因子 96T
MGLUR3 英文名稱： 代謝型谷酸受體-3 0.2ml
CCDC89 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白89 0.2ml
Anti-KLK14 激肽釋放酶14Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
PC(Human plasma anticoagulant protein C) ELISA Kit 人血漿抗凝蛋白CMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-RACK1 受體激活蛋白激酶C1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh HDBP2/PTTG1IP 瘤病毒調(diào)控因子1(鋅指蛋白395) 規(guī)格 0.2ml
AQP-2 ELISA Kit 大鼠水通道蛋白2 96T
P51A 英文名稱： 抑制基因p63α 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-dog IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗狗IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-phospho-STAT3 (Ser727) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
NADPH ELISA Kit 大鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-AVPR2/FITC 熒光素標(biāo)記精氨酸加壓素受體2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EVC2 膜蛋白EVC2 規(guī)格 0.1ml
CSF(Human colony-stimulating factor) ELISA Kit 人集落刺激因子 96T
Met Enkephalin 英文名稱： 甲硫酸腦啡肽 0.2ml
Connexin-45 英文名稱： 間隙連接蛋白45 0.1ml
Anti-Nogo-B/A 軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子-B/AMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
RV(Human RotavirusIgM) ELISA Kit 人輪狀病毒IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-mu Opioid receptor μ-型受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh LANCL2 G蛋白偶聯(lián)受體69B 規(guī)格 0.2ml
ER(Human Estradiol receptor) ELISA Kit 人雌二醇受體 96T
P2RX7 英文名稱： 嘌呤受體P2X7 0.2ml
