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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4151
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-03-14
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4151 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
環(huán)紋背帶線蟲探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書 | Teladorsagia circumcincta | LZR4151 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
弗雷曲霉Sheep PIINP (Procollagen II N-Terminal ProPeptide) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus fresenii
果生鏈核盤菌Sheep LEPR (Leptin Receptor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
葡萄座腔菌Sheep PLA1 (Phospholipase A1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母Sheep CX43 (Connexin 43) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
哈茨木霉Sheep c-fos ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
產(chǎn)酸克雷伯氏菌Sheep UBAP2 (Ubiquitin Associated Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Klebsiella oxytoca
玉米黑粉菌Sheep PEX2 (Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Ustilago maydis
突孢毛殼Sheep GP6 (Glycoprotein VI, Platelet) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium murorum
多粘類芽胞桿菌Sheep CTNNβ1 (Catenin, Beta 1) ELISA Kit 用途: 分類 研究
釀酒酵母Sheep CSF3/GCSF (Granulocyte Colony Stimulating Factor 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
枯草芽孢桿菌Sheep SIGLEC8 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 8) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
阪崎腸桿菌Sheep IL-3 (Interleukin 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Enterobacter sakazakii
*芽胞桿菌(Bacillus atrophaeus)ATCC 9372;(曾用名:枯草芽胞桿菌黑色變種)Sheep FADS2 (Fatty Acid Desaturase 2) ELISA Kit規(guī)格: 10 ml/瓶
核盤菌Sheep MSR1 (Macrophage Scavenger Receptor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Sclerotinia sclerotiorum
琉球曲霉Sheep IFN-α (Interferon Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus luchuensis
環(huán)紋背帶線蟲探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書大鼠前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒英文名稱:Rat thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit特價(jià)促銷
大鼠素B2(TXB2)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
大鼠調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒英文名稱:Rat thrombomodulin,TM ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Fibrinogen,Fbg ELISA Kit進(jìn)口/原裝
URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation)C terminal 肝炎病毒X蛋白(HBxAg)C端抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
anti-14-3-3 14-3-3蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf (Ser289) 磷酸化原癌基因c-Raf 規(guī)格 0.1ml
CCDC70 英文名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白70 0.2ml
Anti-Phospho-FoxO3a (Ser318/321) 磷酸化叉頭蛋白3AMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
VEGF-R1 小鼠內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-F1 operon positive regulatory protein(NT) 肺耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(N端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MRP1/ABCC1 多藥耐藥相關(guān)蛋白1 規(guī)格 0.1ml
HPRI(Human placental ribonuclease inhibitor) ELISA Kit 人胎盤核糖核酸抑止劑 96T
S100A6 英文名稱: S100鈣結(jié)合蛋白A6 0.1ml
CaIPLA2 英文名稱: 胞漿鈣獨(dú)立磷脂酶A2 0.1ml
Anti-CD328/Siglec-7 唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素7Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse proliferating cell nuclear antigen antibody,PCNA ELISA Kit進(jìn)口/原裝
小鼠抗中性粒/中心體(ACA)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse anti-centrol and centrosome antibody,ACA ELISA Kit 特價(jià)促銷
小鼠抗中性粒細(xì)胞核周(pANCA)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠抗子宮內(nèi)膜(EMAb)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Endometrium Antibody,EMAb ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse granzymes A,Gzms-A ELISA Kit進(jìn)口/分裝
Complement fragment 3c 英文名稱: 補(bǔ)體片段C3c 0.2ml
Anti-FLT-3/CD135 FMS樣酪氨酸激酶3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
mouse Caspase-7 小鼠Caspase-7Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-FLT3 (Tyr591) 磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rabbit IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml
Irna(Human Immune RNA) ELISA Kit 人免疫核糖核酸 96T
Phospho-Smad1 (Ser465) 英文名稱: 磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1 0.1ml