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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

異配囊接霉PDIA5 (Protein Disulfide Isomerase A5) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor heterogamus

嗜果刀孢FGF4 (Fibroblast Growth Factor 4) ELISA Kit 拉丁屬名: tigmina carpophila

扣囊復(fù)膜孢酵母EFNA1 (Ephrin A1) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomycopsis fibuligera

巨大芽孢桿菌CP (Ceruloplasmin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  megaterium

黃褐牛肝菌GNβ1 (G Protein Beta 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Boletus subsplendidus W.F. Chiu

銅綠假單胞菌CABIN1 (Calcineurin Binding Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas  aeruginosa

狹旋毛殼AP 17 (Apelin 17) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium angustispirale

樟疫霉PKD1 (Protein Kinase D1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

環(huán)形凸臍蠕孢GAD2 (Glutamate Decarboxylase 2) ELISA Kit 用途: 研究

人纖維單胞菌CYP1A2 (Cytochrome P450 1A2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

產(chǎn)氣莢膜梭菌       毒素C型GFAP (Glial Fibrillary Acidic Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: perfringens       Type C

釀酒酵母ACAT2 (Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

鹽反硝化枝芽孢桿菌 IGFBP-2 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Virgibacillus halodenitrificans

大腸桿菌SYNPO (Synaptopodin) ELISA Kit 用途: 獲得來源于Thermus菌屬的耐高溫酶類用于科學(xué)研究及功能檢測

雷丸*BCL2L1/BCL-X (Bcl-2 Like Protein 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
念珠狀鏈桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 AADACL4 英文名稱： 芳香乙酰胺脫乙?；笜拥鞍? 0.2ml

Anti-A/H1N1-M2 Human/Gold 膠體金標(biāo)記兔抗人A型病毒H1N1-M2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

IL-7(Mouse Interleukin-7) ELISA kit 小鼠白介素7Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Caspase-6 (NT)/FITC 熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(N端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ELOVL6 長鏈脂肪酸延長酶長ELOVL6 規(guī)格 0.2ml

phytohaemagglutinin,PHA ELISA Kit 植物血凝素 96T

METTL11A 英文名稱： 甲基化樣蛋白11(N端) 0.1ml

CCDC138 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白138 0.2ml

Anti-KLF5 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

LP Ab-IgG(Human Legionella antibody IgG) ELISA Kit 人軍團(tuán)菌IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-phospho-Kinesin 5B (Ser272) 磷酸化Kinesin 5BMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh LASS2 轉(zhuǎn)移抑制基因1 規(guī)格 0.2ml

CA(Human catecholamine) ELISA Kit 人兒茶酚胺 96T

P2Y8 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y8 0.2ml

phospho-Desmin (Thr16) 英文名稱： 磷酸化結(jié)蛋白 0.1ml

Anti-ACEI 緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

ESYT1 英文名稱： 延伸突觸蛋白1 0.2ml

軸索過度生長抑制因子-B Anti-Nogo-B 0.2ml

Anti-Phospho-SirT1 (Ser47) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-P53(Thr18) 磷酸化抑制基因P53 規(guī)格 0.1ml

Bax peptide Bax(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CNN2 英文名稱： 平滑肌鈣調(diào)蛋白CNN2 0.2ml

Anti-IL-8/CXCL8 (mouse, rat) 白介素8 (小鼠，大鼠)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

LN 人層粘連蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CK II alpha/STK 屬絲/蘇氨酸蛋白質(zhì)激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NT/NTS1/NTRH 神經(jīng)降壓素 規(guī)格 0.1ml

Plasmid Minipreparation Kit 質(zhì)粒小提試劑盒 100次(100個硅膠柱和試劑)

RNF125 英文名稱： 環(huán)指蛋白125 0.2ml