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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4007
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-03-14
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4007 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鼻疽假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Pseudomonas mallei | LZR4007 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
稻梨孢MSTN (Myostatin) ELISA Kit拉丁屬名: Pyricularia oryzae
玫煙色棒束孢DBP (Vitamin D Binding Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Isaria fumosorosea
香菇屬CGRP (Calcitonin Gene Related Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Lentinula sp.
海綿假單胞菌TG (Thyroglobulin) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas pachastrellae
水稻腸桿菌TLN (Talin) ELISA Kit拉丁屬名: Enterobacter oryzae
阿利坎特港富鹽菌ANG I (Angiotensin I) ELISA Kit拉丁屬名: Haloferax lucentensis
米曲霉LN (Laminin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus oryzae
ThermobifidaSEMA4C (Semaphorin 4C) ELISA Kit拉丁屬名: Thermobifida halotolerans
耐賴氨酸芽孢桿菌LRP (Lung Resistance-Related Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Lysinibacillus boronitolerans
釀酒酵母PDGFRα (Platelet Derived Growth Factor Receptor Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
光滑青霉TDT (Terminal Deoxynucleotidyl Transferase) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium glabrum
嗜熱鏈球菌PKBG (Protein Kinase B Gamma) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptococcus thermophilus
pBV220CA5B (Carbonic Anhydrase VB, Mitochondrial) ELISA Kit規(guī)格: 1ml甘油管1支,20ul質(zhì)粒,一般次日下午
黃柄曲霉FcaR (Fc Fragment of IgA Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus flavipes
紅細(xì)菌COL14 (Collagen Type XIV) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodobacter sp.
鼻疽假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Anti-ATXN1 失調(diào)癥蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-alpha Adducin(Ser726) 磷酸化內(nèi)收蛋白a1 規(guī)格 0.1ml
Neurofilament 神經(jīng)絲蛋白 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
URP2 英文名稱: 整合素結(jié)合性信號分子 0.1ml
DAP5 英文名稱: 死亡相關(guān)蛋白5 0.1ml
Anti-ATXN1 失調(diào)癥蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Etv5 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子Ets差異基因5 0.2ml
CAMKK2 英文名稱: 鈣調(diào)蛋白激酶激酶β 0.1ml
Anti-EDG2/LPA1 溶血磷脂酸受體蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
MYD88(Human myeloid differentiation primary response gene 88) ELISA Kit 人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-PAX2 配對盒基因2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HORMAD2 異質(zhì)核糖核蛋白U2樣蛋白 規(guī)格 0.2ml
S-100 ELISA Kit 大鼠S100蛋白 96T
PTP1B 英文名稱: 蛋白酪酸磷酸酶-1B 0.1ml
beta-Amyloid 1-42(CT) 英文名稱: β淀粉樣肽/Aβ42 0.1ml
Anti-CD137/TNFRSF9/FITC 熒光素標(biāo)記CD137IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
IGF-1 ELISA Kit 大鼠樣生長因子1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-BAFFR/Tnfrsf13c/CD268/FITC 熒光素標(biāo)記B細(xì)胞活化因子受體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ET-1(2C4) 內(nèi)皮素-1單克隆 規(guī)格 0.2ml
sCKR(Human soluble cytokine receptor) ELISA Kit 人可溶性細(xì)胞因子受體 96T
MSK1 英文名稱: 有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1 0.2ml
CIRBP 英文名稱: 冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白 0.2ml
Anti-phospho-P53 (Thr18) 磷酸化抑制基因P53Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
MLKL(Human mixed lineage kinase domain-like) ELISA Kit 人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Paxillin 樁蛋白PaxillinMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh hnRNP R 異質(zhì)性核糖核蛋白R 規(guī)格 0.2ml
AMA IgA(Human anti-myelin antibody IgA) ELISA Kit 人抗髓磷脂IgA 96T
PCDHB6 英文名稱: 原鈣粘附蛋白β6 0.1ml