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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

蠟狀芽孢桿菌VacA (Vacuolating Cytotoxin A) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus

嗜堿假單胞菌UBE1L (Ubiquitin Activating Enzyme E1 Like Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas alcalophila

棱柱散尾菌PI3K (Phosphoinositide-3-Kinase) ELISA Kit用途: 食、藥用

榛針孢酵母PRDX1 (Peroxiredoxin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Nematospora  coryli

枯草芽孢桿菌UBE2C (Ubiquitin Conjugating Enzyme E2C) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

MMP-24 (Matrix Metalloproteinase 24) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

釀酒酵母MCSFR (Macrophage Colony Stimulating Factor Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

解橡膠諾卡氏菌ACVA (Activin A) ELISA Kit拉丁屬名: Nocardia cummidelens

土壤桿菌MYO (Myosin) ELISA Kit用途: 降解

尖鐮孢EP2 (Prostaglandin E Receptor 2 ) ELISA Kit  用途: 藥用植物內(nèi)生菌

德蘭士瓦哈薩克斯坦酵母 IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Kazachstania transvaalensis

Ohtaekwangia koreensisANG II R2/AGTR2 (Angiotensin II Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Ohtaekwangia koreensis

泳池鞘氨單胞菌TUBα3C (Tubulin Alpha 3c )ELISA Kit 拉丁屬名: Sphingomonas natatoria

釀酒酵母 MSLN (Mesothelin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

大腸埃希氏桿菌CSF2Rβ (Colony Stimulating Factor 2 Receptor Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia  coli
真鯛虹彩病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格Ephrin B 英文名稱： Ephrin B 0.1ml

轉(zhuǎn)錄因子7類似物2 anti-TCF7L2 0.2ml

Anti-Phospho-TLK1 (Ser695)/FITC 熒光素標記磷酸化調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-LKB1(Ser334) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶 規(guī)格 0.1ml

NT-3 神經(jīng)生長因子-3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒英文名稱：Rat amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit特價促銷

大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒英文名稱：Rat amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA Kit特價促銷

capsid protein 英文名稱： 豬圓環(huán)病毒Ⅱ型衣殼蛋白 0.2ml

Anti-phospho-FOXO4 (Ser197) 磷酸化叉頭蛋白4Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

MAdCAM-1(Human mucosal addressin cell adhesion molecule-1) ELISA Kit 人黏膜地址素細胞黏附分子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-phospho-FOXO4 (Ser262) 磷酸化叉頭蛋白4Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgM/Cy7 Cy7標記的小鼠抗人IgM 規(guī)格 0.1ml

C/EBP Delta(Human CCAAT/enhancer binding protein deta) ELISA Kit 人CCAAT增強子結(jié)合蛋白δ 96T

SPOCK1 英文名稱： 蛋白聚糖1 0.2ml

CDK11 英文名稱： 周期素依賴性激酶11 0.2ml

Anti-phospho-c-Jun (Ser63) 磷酸化原癌基因c-JunMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Lumbrokinase 蚯蚓纖溶酶(蚓激酶抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-SLAMF9 CD2F-10Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子 規(guī)格 0.1ml

CST7 Kit Human 人 Cystatin F / CST7 ELISA配對 ELISA

Thymidylate synthase 英文名稱： 胸苷酸合成酶 0.1ml

CK17 英文名稱： 細胞角蛋白17 0.1ml

Anti-NT 神經(jīng)降壓素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

AlphaENOL(Human Alpha-enolase) ELISA Kit 人α烯醇化酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-NF2/merlin 2型神經(jīng)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh IL-2 白介素2(人) 規(guī)格 0.2ml

ARPA/Rib-P(Human anti-ribosomal P protein antibody) ELISA Kit 人抗核糖體P蛋白 96T

Phospho-p63 (Ser395) 英文名稱： 磷酸化P63抑制基因 0.1ml