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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4009
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-03-14
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4009 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
假單胞菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 | Pseudomonas spp. | LZR4009 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
哈茨木霉FGF6 (Fibroblast Growth Factor 6) ELISA Kit 拉丁屬名: Trichoderma harzianum
亮白曲霉CK-19/KRT19 (Cytokeratin 19) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus candidus Link
伯克霍爾德菌*NRG-3 (Neuregulin 3) ELISA Kit拉丁屬名: Burkholderia sp.
枯草芽胞桿菌ACD (Adrenocortical Dysplasia Homolog) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
松口蘑ARO (Aromatase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
普通變形桿菌*Cyt-C (Cytochrome C) ELISA Kit拉丁屬名: Proteus vulgaris
中間氣單胞菌CT (Calcitonin) ELISA Kit拉丁屬名: Aeromonas media
地衣芽胞桿菌sICAM-1 (Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus licheniformis
巴氏醋桿菌Pro-MMP-1 (pro-Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Acetobacter pasteurianus
冰川薄層菌屬ANGPTL6 (Angiopoietin Like Protein 6) ELISA Kit 拉丁屬名: Hymenobacter glaciei
釀酒酵母GAP (GTPase Activating Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
總狀毛霉TIMP-1 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor racemosus
枯草芽孢桿菌PG (Proteoglycan) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
圍小叢殼菌LDHC (Lactate Dehydrogenase C) ELISA Kit 用途: 植物病原物,用于種群的遺傳學(xué)研究和炭疽病害的診斷和防治
哈茨木霉D4R/DRD4 (Dopamine Receptor D4) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
假單胞菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 Cytokeratin 19 英文名稱: 細(xì)胞角蛋白19 0.1ml
Anti-Phospho-c-Kit (Tyr719) 磷酸化原癌基因c-kitMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
鴨白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 英文名稱:Duck Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒英文名稱:Duck Interleukin-8,IL-8 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
鴨毒(DEV)ELISA試劑盒英文名稱:Duck virus enteritis,DEV ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
鴨環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒英文名稱:Duck cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
鴨抗凝血素(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒英文名稱:Duck anti-prothrombins antibodies,aPT1/aPT2 ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
CANX 英文名稱: 鈣連蛋白 0.1ml
Anti-IL-28B/IL-28C 白細(xì)胞介素28BMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CK-13(Human cytokeratin 13) ELISA Kit 人細(xì)胞角蛋白13Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-HBV pre S1/S2 protein 人乙毒pre S1/S2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mitochondrial ribosomal protein L11 線粒體核糖體蛋白L11 規(guī)格 0.2ml
E3/UBPL(Human E3/ubiquitin-protein ligase) ELISA Kit 人泛素連接酶 96T
phospho-Rb (Ser780) 英文名稱: 磷酸化成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤蛋白 0.1ml
Phospho-Bad (Ser134) 英文名稱: 磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子 0.1ml
Anti-Stra8 視黃酸激活基因8Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
human major vault protein,MVP ELISA Kit 人主要穹窿蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-SIRT1 沉默調(diào)節(jié)蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-rat IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
SHBG(Mouse sex hormone-binding globulin) ELISA Kit 小鼠性激素結(jié)合球蛋白 96T
NCKAP1 英文名稱: 膜相關(guān)的蛋白質(zhì)HEM2 0.2ml
CITED1 英文名稱: 結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1 0.2ml
Anti-MBP 髓鞘堿性蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Human preptin ELISA Kit 人preptinMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-HCMV 人巨細(xì)胞病毒Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh KAT2B/ GCN5/PCAF 組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶PCAF 規(guī)格 0.1ml
IL-8/CXCL8 ELISA Kit 大鼠白介素8 96T
PHKG1 英文名稱: 磷酸化酶激酶γ1 0.2ml