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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3958
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-03-14
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3958 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
奧爾森派琴蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Perkinsus olseni | LZR3958 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
抗生鏈霉菌FBLN5 (Fibulin 5) ELISA Kit用途: 拮抗菌
生黃色鏈霉菌MMP-10 (Matrix Metalloproteinase 10) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces chromoflavus
米曲霉PF4 (Platelet Factor 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus oryzae
鮑姆桑黃GPIIb/IIIa (Platelet Membrane Glycoprotein IIb/IIIa) ELISA Kit拉丁屬名: Sanghuangporus baumii
平臍蠕孢菌SSFA2 (Sperm Specific Antigen 2) ELISA Kit 用途: 研究
亮白曲霉UPP2 (Uridine Phosphorylase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus candidus Link
羅爾夫青霉T4 (Thyroxine) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium rolfsii
扣囊復(fù)膜孢酵母GHRH (Growth Hormone Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomycopsis fibuligera
擬棒形節(jié)叢孢HSF1 (Heat Shock Transcription Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobotrys pseudoclavata
柱隔孢菌PIIINP (N-Terminal Procollagen Ⅲ Propeptide) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
克魯斯假絲酵母IGFBP-7 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 7) ELISA Kit拉丁屬名: Candida krusei
大腸埃希氏桿菌 PSAP (Prosaposin) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
樟疫霉NUP160 (Nucleoporin 160kDa) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
克雷伯氏菌屬PROC (Protein C) ELISA Kit拉丁屬名: Klebsiella sp.
枯草芽胞桿菌PYY (Peptide YY) ELISA Kit用途: 分類 研究
奧爾森派琴蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β受體2 Anti-TGF-βR 2 0.1ml
SHFM3 英文名稱： SHFM3蛋白 0.2ml
Yellow fever virus envelope glycoprotein E 英文名稱： 黃熱病毒包膜糖蛋白 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-LATS1 (Ser909) 磷酸化抑制基因LATS1 規(guī)格 0.1ml
OGP (Ostegenic Growth Peptide) 成骨生長(zhǎng)肽 (骨生長(zhǎng)激素肽)(蛋白多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
EphB6 英文名稱： 酪酸蛋白激酶受體B6 0.1ml
包含氧化還原酶的WW域 Anti-WWOX 0.1ml
CABP5 英文名稱： 鈣結(jié)合蛋白5/3 0.2ml
Anti-Phospho-eIF2 alpha (Ser51) 磷酸化真核啟動(dòng)因子2αMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Bcl-2 大鼠Bcl-2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Phospho-p56Dok2(Tyr351) 磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Nck1/NCK alpha NCK銜接蛋白1 規(guī)格 0.2ml
Human anti-thrombin receptor,ATR ELISA Kit 人抗凝血酶受體 96T
S100B 英文名稱： S100B蛋白 0.1ml
Anti-Calpain 2 鈣激活的中性蛋白酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh PDGFRA 血小板源性生長(zhǎng)因子受體A(PDGFRα) 規(guī)格 0.1ml
Apolipoprotein D 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
TRAIL 英文名稱： 壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體 0.1ml
CEA 英文名稱： 癌胚抗原 0.1ml
Anti-Calpain 2 鈣激活的中性蛋白酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse transforming growth factor α,TGF-α ELISA Kit進(jìn)口/原裝
Chicken IgY 英文名稱： 兔抗雞IgY 1mg
Anti-GATA-5 GATA結(jié)合蛋白5Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
APF(Human anti-perinuclear factor) ELISA Kit 人抗核周因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-IL-28A/IFNL2 白細(xì)胞介素28AMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh LRRC41 LRRC41蛋白 規(guī)格 0.2ml
HA(Human hemagglutinin) ELISA Kit 人血凝素 96T
Phospho-Rb (Thr826) 英文名稱： 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1 0.1ml
