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PCR反應鑒定——PCR反應條件:

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數據分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品：

尖孢鐮孢AAA (Anti-Albumin Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium oxysporum

CupriavidusTXB2 (Thromboxane B2) ELISA Kit拉丁屬名: Cupriavidus gilardii

棲土梭孢殼PDIA3 (Protein Disulfide Isomerase A3) ELISA Kit拉丁屬名: Thielavia terricola

蘇云金芽孢桿菌松躅亞種EPI (Epinephrine/Adrenaline) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus thuringiensis subsp. dendrolimus

矩圓黑盤孢ITLN1 (Intelectin 1/Omentin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

嗜麥芽糖寡養(yǎng)單胞菌ApoA1 (Apolipoprotein A1) ELISA Kit拉丁屬名: Stenotrophomonas maltophilia

枯斑擬盤多毛孢Grb7 (Growth Factor Receptor Bound Protein 7) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

地衣芽胞桿菌GM-CSF Ab (Anti-Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor Antibody) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus licheniformis

環(huán)發(fā)仙菌VIPR1 (Vasoactive Intestinal Peptide Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Pilimelia anulata

擬無枝菌酸菌WARS (Tryptophanyl tRNA Synthetase) ELISA Kit拉丁屬名: Amycolatopsis  sp.

產黃青霉CCNB (Cyclin-B) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium chrysogenum

費氏中華根瘤菌TRY (Trypsin) ELISA Kit 用途: 能在大豆上結瘤固氮，YMA培養(yǎng)基上生長速度快，產酸

聚多曲霉GKN1 (Gastrokine 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus sydowii

維氏氣單胞菌CDK6 (Cyclin Dependent Kinase 6) ELISA Kit拉丁屬名: Aeromonas veronii

塔賓曲霉ApoF (Apolipoprotein F) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus tubingensis
衣阿華支原體探針法熒光定量PCR試劑盒 NTAL  B淋巴細胞鏈接激活蛋白抗體

KRCC1  含賴氨酸卷曲螺旋蛋白1抗體

LACTB2  β內酰胺酶樣蛋白2抗體

LAPTM4A  溶酶體相關膜蛋白4α抗體

LMBR1/DIF14  分化相關基因14抗體

VMAT2  腦單胺類神經遞質轉運蛋白抗體

Na+/K+-ATPase Alpha1  Na+/K+-ATPase α1 鈉鉀ATP酶α1多肽抗體