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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
軍團(tuán)菌屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR3764
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-03-17
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR3764
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

軍團(tuán)菌屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商

Legionella spp.

LZR3764


熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

嘴突凸臍蠕孢Monkey MRP (Multidrug Resistance-Associated Protein) ELISA Kit用途: 研究

球毛殼*Monkey GLP-2 (Glucagon Like Peptide 2) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium globosum Kunze :Fries

金黃桿菌屬Monkey PKN1 (Protein Kinase N1) ELISA Kit 拉丁屬名: Chryseobacterium  yeoncheonense

枯草芽孢桿菌Monkey RHOA (Ras Homolog Gene Family, Memmber A) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

鈉線菌屬Monkey BGN (Biglycan) ELISA Kit拉丁屬名: Natrinema  sp.

萎蔫短小桿菌Monkey PHB (Prohibitin) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

糙皮側(cè)耳Monkey RARα (Retinoic Acid Receptor Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus ostreatus

金龜子綠僵菌Monkey FBN1 (Fibrillin 1) ELISA Kit 用途: 防治松毛蟲

稍黃鏈霉菌Monkey RLR (Retinoic Acid Inducible Gene/RIG-Like Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces rubiginosus

戊糖乳桿菌Monkey CYTH1 (Cytohesin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus  pentosus

枯草芽孢桿菌Monkey Anti-Surv (Anti-Survivin Antibody) ELISA Kit  拉丁屬名: Bacillus subtilis

卡利比克畢赤酵母Monkey ALD (Aldolase) ELISA Kit拉丁屬名: Pichia caribbica

長(zhǎng)根菇Monkey TJP1 (Tight Junction Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Oudemanciella radicata (Relhan.:Fr.) Sing

榨菜檸檬球菌Monkey PFKM (Phosphofructokinase, Muscle) ELISA Kit拉丁屬名: Citricoccus zhacaiensis

粘紅酵母Monkey VEGF-C (Vascular Endothelial Growth Factor C) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhodotorula glutinis (Fresenius) Harrison
軍團(tuán)菌屬通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒供應(yīng)商BEND4/CCDC4  BEND4蛋白抗體扁塑藤素pristimerin中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C30H40O4 分 子 量: 464.642

BEND6  BEND6蛋白抗體靈芝酸GGanoderic acid G中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C30H44O8 分 子 量: 532.66556

c-ABL1/2(Tyr393/429)  磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體L-精氨酸L-Arginine化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C6H14N4O2 分 子 量: 174.20096

NF-κB p105/p50(Phospho-Ser373)  磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體溶菌酶(Lysozyme,10mg/ml)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

phospho-C-Myc(Thr373)  磷酸化致癌基因C-Myc抗體五氯苯硫酚Pentachlorothiophenol化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C6Hscl5 分 子 量: 282.40214

Lin28  RNA結(jié)合蛋白LIN28抗體7,2’-二羥基-3’,4’-二甲氧基-異黃烷-7-O-β-D-葡萄糖苷;2’-羥基- 3’,4’-二甲氧基異黃烷-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷b-D-Glucopyranoside,3,4-dihydro-3-(2-hydroxy-3,4-dimethoxyphenyl)-2H-1-benzopyran-7-yl中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C23H28O10 分 子 量: 464.46242

Phospho-BRCA1(Ser988)  磷酸化易感基因1抗體McIlvaine緩沖液(pH3.0-8.0)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

 


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