|
- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3719
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-03-18
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3719 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
人病毒13探針法熒光定量PCR試劑盒說(shuō)明書 | Human Papillomavirus 13(HPV-13) | LZR3719 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
榆黃蘑Monkey CCL3L1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
深色殼囊孢Monkey CVNPF (Cobra Venom Neuronal Protective Factor) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物
蟬花Monkey MMP-2 (Matrix Metalloproteinase 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
水生黃桿菌Monkey SF1 (Steroidogenic Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Flavobacterium hydatis
皮生毛霉Monkey EPHA10 (Ephrin Type A Receptor 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Mucor corticola
黑根霉Monkey PKR1 (Prokineticin Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus nigricans
芽殖球菌屬Monkey ODC (Ornithine Decarboxylase) ELISA Kit 拉丁屬名: Blastococcus sp.
刺孢小克銀漢霉輪生變種Monkey OPGL (Osteoprotegerin Ligand) ELISA Kit拉丁屬名: Cunninghamella echinulata var. verticillata
枯草芽胞桿菌Monkey PAR4 (Protease Activated Receptor 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
乳酸乳球菌葉蟬亞種Monkey APA (Anti-Phospholipid Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Lactococcus lactis subsp. hordniae
釀酒酵母Monkey ANG II R2/AGTR2 (Angiotensin II Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
雜硅鹽礦物節(jié)桿菌Monkey MCP-4/CCL13 (Monocyte Chemotactic Protein 4) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter siccitolerans
彎孢菌Monkey SGK2 (Serum/Glucocorticoid Regulated Kinase 2) ELISA Kit用途: 研究
枯草芽孢桿菌Monkey EED (Embryonic Ectoderm Development) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
綠色糖單孢菌Monkey AIF1 (Allograft Inflammatory Factor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomonospora viridis
人病毒13探針法熒光定量PCR試劑盒說(shuō)明書CCDC8 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體靈芝酸AGANODERIC ACID A中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H42O7 分 子 量: 514.65028
CCDC83 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白83抗體七葉皂苷Da-D-Glucopyranosiduronic acid,(3a,4a,16R,21a,22R)-28-(acetyloxy)-16,- 22,23-trihydroxy-21-[[(2Z)-2-methyl-1-oxo- 2-butenyl]oxy]olean-12-en-3-yl O-a-D-glucopyranosyl-(1f2)-O-[a-Dglucopyranosyl-( 1f4)]- 中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C55H86O24 分 子 量: 1131.25694
CCDC87 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白87抗體多聚甲醛溶液(4% PFA)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
ANP 心鈉素抗體Spinner鹽粉劑(1×,含酚紅)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
CCDC88B/BRLZ/HkRP3 大腦亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)域蛋白抗體歐夾竹桃苷Oleandrin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C32H48O9 分 子 量: 576.72
CCDC92 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白92抗體沃塔紫杉醇Hexanoic acid,3-[[(1,1-dimethylethoxy)carbonyl]amino]-2-hydroxy-5-methyl-,(3aS,4R,7R,8aS,9S,10aR,12aS,12bR,13S,13aS)-7,12a-bis(acetyloxy)-13-(benzoyloxy)-3a,4,7,8,8a,9,10,10a,12,12a,12b,13-dodecahydro-9-hydroxy-5,8a,14,14-tetramethyl-2,8-dioxo-6,13a-methano-13aH-oxeto[2'',3'':5',6']benzo[1',2':4,5]cyclodeca[1,2-d]-1,3-dioxol-4-ylester, (2R,3S)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C44H57NO17 分 子 量: 871.919880000001
CCDC93 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白93抗體免疫染色洗滌液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
