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PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

日本曲霉FABP6 (Fatty Acid Binding Protein 6, Ileal) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus japonicus

乳酸乳球菌乳亞種MAPK14 (Mitogen Activated Protein Kinase 14) ELISA Kit拉丁屬名: Lactococcus lactis subsp. lactis

釀酒酵母CK-HMW (Cytokeratin High Molecular Weight) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

費氏檸檬酸桿菌HLTF (Helicase Like Transcription Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Citrobacter  freundii

豌豆根瘤菌fFDFT1 (Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1) ELISA Kit用途: 與蠶豆、豌豆共生固氮

檸檬明串珠菌Apo A1-Ab (Anti-Apolipoprotein A1 antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Leuconostoc  citreum

貝形側(cè)耳COL1α1 (Collagen Type I Alpha 1) ELISA Kit  用途: 食用

釀酒酵母TrxR1 (Thioredoxin Reductase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

泡盛曲霉GnRH (Gonadotropin Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  awamori

黑曲霉CA1 (Carbonic Anhydrase I) ELISA Kit 用途: 檸檬酸深層發(fā)酵菌

慢生根瘤菌GROα/CXCL1/NAP3 (Growth Regulated Oncogene Alpha) ELISA Kit用途: 與胡枝子共生固氮

狹截盤多毛孢ELA4 (Elastase 4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

解脂假絲酵母FLRT2 (Fibronectin Leucine Rich Transmembrane Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida  lipolytica

解蛋白奇異球菌CDK1 (Cyclin Dependent Kinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Deinococcus proteolyticus

南極節(jié)桿菌ES (Endostatin) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter   antarcticus
絲菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商MALT1  粘膜相關(guān)淋巴組織轉(zhuǎn)運蛋白1抗體IPTG(20%,0.8mol/L)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

NALP12  NALP12抗體糠酸Furan-2-carboxylic acid中藥標準品  分 子 式: C5H4O3 分 子 量: 112.08346

NALP6  富含亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體鹽酸吐根堿2H-Benzo[a]quinolizine,3-ethyl-1,3,4,6,7,11b-hexahydro-9,10-dimethoxy-2-[[(1R)-1,2,3,4-tetrahydro-6,7-dimethoxy-1-isoquinolinyl]methyl]-,hydrochloride (1:1), (2S,3R,11bS)-化學(xué)標準品 分 子 式: C29H40N2O4.HCl 分 子 量: 517.09984

NLRP7  富含亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體苯甲酰烏頭原堿benzoylaconine化學(xué)標準品 分 子 式: C32H45NO10.HBr 分 子 量: 684.61234

NLRP9  富含亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體對葉百部堿化學(xué)標準品 分 子 式:  分 子 量:

ARMER  ARMER抗體雷公藤酚A24,25,26-Trinoroleana-1,3,5(10),7-tetraen-29-oicacid, 2,3-dihydroxy-9,13-dimethyl-6-oxo-, (9b,13a,14b,20a)-化學(xué)標準品 分 子 式: C29H38O5 分 子 量:

HBXIP  病毒X蛋白相互作用蛋白Kodak F-5定影液標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量: