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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數據分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品：

枯草芽孢桿菌COMP (Cartilage Oligomeric Matrix Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis

多粘類芽孢桿菌CASP3 (Caspase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus  polymyxa

圍小叢殼CASP4 (Caspase 4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

牡丹枝孢（牡丹葉霉病菌）CASP7 (Caspase 7) ELISA Kit用途: 教學科研

紅酵母屬CASP9 (Caspase 9) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodotorula glacialis

加拿大色鹽桿菌CASP10 ( Caspase 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Chromohalobacter canadensis

小鏈霉菌CASP12 (Caspase 12) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces parvus

赭色擲孢酵母CASP14 (Caspase 14) ELISA Kit 拉丁屬名: Sporobolomyces salmonicolor

大腸桿菌屬ET-1 (Endothelin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia  coli

釀酒酵母CTNNa1 (Catenin, Alpha 1 )ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

木糖氧化無色桿菌CTNNb (Catenin, Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Achromobacter xylosoxidans

栗疫菌CTSD (Cathepsin D) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

*瓜果腐霉菌CTSK (Cathepsin K) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

香菇CTSL (Cathepsin L) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

木生炭角菌CDX2 (Caudal Type Homeobox Transcription Factor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Xylaria arbuscula
馬梭菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Ractopamine /PAYLEAN (1B12)  小鼠抗萊克多巴胺單克隆抗體鹽酸伊立替康Irinotecan HCL中藥標準品  分 子 式: C33H38N4O6.HCl 分 子 量: 623.13896

Cellulase  纖維素酶SDS溶液(10%)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

Pectinesterase  果膠酶抗體香蘭素4-Hydroxy-3-methoxybenzaldehyde中藥標準品  分 子 式: C8H8O3 分 子 量: 152.14732

DLK1/Delta/DLL1 (C-terminus)  穿膜蛋白DLK1抗體（C端）次苦參素kuraridin化學標準品 分 子 式: C26H30O6 分 子 量: 438.5128

ADD1/alpha Adducin  內收蛋白a1抗體β-乙酰氧基異戊酰阿卡寧(1S)-1-(5,8-dihydroxy-1,4-dioxo-1,4-dihydronaphthalen-2-yl)-4-methylpent-3-en-1-yl 3-(acetyloxy)-3-methylbutanoate化學標準品 分 子 式: C23H26O8 分 子 量: 430.44774

Gibberellins  牛磺酸/β-氨基乙磺酸抗體多聚賴氨酸溶液(1×PLL,0.1mg/ml)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

EGF  表皮生長因子抗體Acr-Bis(40%:2%)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量: