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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

黃桿菌MYO (Myoglobin) ELISA Kit拉丁屬名: Flavobacterium sp.

小孢根霉原變種Tn-T (Troponin T) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus microsporus var. microsporus

中慢生根瘤菌Tn-I (Troponin I) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

溜曲霉PAPPA (Pregnancy Associated Plasma Protein A) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  tamarii

多孢木霉ALP (Alkaline Phosphatase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

蘇云金芽胞桿菌NSE (Neuron Specific Enolase) ELISA Kit用途: 用于抗蟲基因的分離和抗蟲相關(guān)基礎(chǔ)研究。

臭曲霉GLP-1 (Glucagon Like Peptide 1) ELISA Kit用途: 糖化酶產(chǎn)生菌

小橢圓接合酵母SP-A (Pulmonary Surfatcant-Associated Protein A) ELISA Kit拉丁屬名: Zygosaccharomyces microellipsoides

歧皺青霉Smad7 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium  steckii

葉球鞘氨單胞菌NE (Neutrophil Elastase) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingomonas phyllosphaerae

谷氨酸棒桿菌IL-12/p40 (Interleukin 12 p40) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

干酪乳桿菌IL-12 (Interleukin 12) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  casei

假單胞菌屬MBP/MBL (Mannma Binding Protein/Mannan Binding Lectin) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas  sp

微球菌AQP-3 (Aquaporin 3) ELISA Kit拉丁屬名: Micrococcus sp.

蘇云金芽孢桿菌松蠋亞種AQP-4 (Aquaporin 4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
枝孢霉通用探針法熒光定量PCR試劑盒 Phospho-MKP1 (Ser318)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶1抗體X-gal(20mg/ml)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

ACTH (18-39)  促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH(18-39)抗體褐煤酸Octacosanoic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C28H56O2 分 子 量: 424.74304

ACTH (7-23)  促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH (7-23)抗體3-羥基-9,10-二甲氧基紫檀烷；美迪紫檀素methyl-中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C37H61NO13 分 子 量: 727.87914

Actin α/alpha-SMA  肌動蛋白α(α-SMA)抗體高香草酸硫酸鹽Benzeneacetic acid,3-methoxy-4-(sulfooxy)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C9H10O7S 分 子 量: 262.2365

Sarcomeric Alpha Actinin/ACTN2  α橫紋肌輔肌動蛋白/α-SCA抗體L-賴氨酸L-Lysine化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C6H14N2O2 分 子 量: 146.18756

alpha Actinin 4  α-輔肌動蛋白4抗體二乙酸丁香樹脂醇酯Syringaresinol diacetate對照藥材 分 子 式: C26H30O10 分 子 量: 502.5104

F-Actin  纖維狀肌動蛋白抗體關(guān)附甲素Hetisan-2,11,13,14-tetrol,2,13-diacetate, (2a,11a,13R)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C24H31NO6 分 子 量: 429.50604