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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3425
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2025-03-21
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3425 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
貓衣原體探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | Chlamydia felis | LZR3425 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
虎皮粘蓋牛肝菌IL-27 (Interleukin 27) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
枯草芽孢桿菌TEF (Thyrotroph Embryonic Factor) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
松針散斑殼TRH (Thyrotropin-releasing Hormone) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
枯草芽孢桿菌TAb (Thyroxine Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
大腸埃希氏菌TBG (Thyroxine Binding Globulin) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
嚙蝕艾肯氏菌T4 (Thyroxine) ELISA Kit拉丁屬名: Eikenella corrodens
星孢鏈霉菌TJP1 (Tight Junction Protein 1) ELISA Kit 用途: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性
大腸埃希氏桿菌TFPI (Tissue Factor Pathway Inhibitor) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
凝結(jié)芽孢桿菌TF (Tissue factor) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus coagulans
蘇云金芽孢桿菌TIMP-2 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 2) ELISA Kit 用途: 害蟲(chóng)生物防治
枯草芽孢桿菌TIMP-3 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
產(chǎn)氨棒桿菌TIMP-4 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Corynebacterium ammoniagenes
釀酒酵母TPA (Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
紅球菌t-PA (Tissue-type Plasiminogen Actilyse) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodococcus qingshengii
挪威假絲酵母TLR9 (Toll-like Receptor 9) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida norvegensis
貓衣原體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 ABCA1/ABC1 腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體異新補(bǔ)骨脂異黃酮2',3'-Dihydro-2',2'-dimethyl-7-hydroxy-3,6'-bi-(4H-1-benzopyran)-on-4化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H16O5 分 子 量: 336.33804
ABCD1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗體去甲基川陳皮素2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-5-hydroxy-6,7,8-trimethoxy-4H-chromen-4-one中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H20O8 分 子 量: 388.368
ABCB5 ATP結(jié)合蛋白家族5抗體托吡酯topiramate化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C12H21NO8S 分 子 量: 339.36
ABCB6 ATP結(jié)合蛋白家族6抗體5-戊基間苯二酚5-Pentylbenzene-1,3-diol對(duì)照藥材 分 子 式: C11H16O2 分 子 量: 180.24354
ABCF1 ATP結(jié)合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體麥冬皂苷COphiopogonin C中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C46H72O17 分 子 量: 897.058
ABCG1 三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體7-O-甲基杧果苷 7-O-Methylmangiferin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H20O11 分 子 量: 436.366
ABCG2/CD338 三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體柯諾辛Corynoxan-16-carboxylicacid, 16,17-didehydro-17-methoxy-2-oxo-, methyl ester, (16E)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H28N2O4 分 子 量: 384.46872
