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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3423
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2025-03-21
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3423 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
雞胚致死孤兒病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū) | Chicken Embro Lethal Orphan Virus(CELOV) | LZR3423 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
灰樹(shù)花TAF4 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 4) ELISA Kit 用途: 用于科研教學(xué)。
根瘤菌MAPτ (Microtubule Associated Protein Tau/Tau Protein) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
澳大利亞糖絲菌TXLNa (Taxilin Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharothrix australiensis
根瘤菌TXLNb (Taxilin Beta) ELISA Kit 用途: 與紫穗槐共生固氮
釀酒酵母TEK (Tyrosine Kinase, Endothelial) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母TE (telomerase) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
維羅納假單胞菌TNC (Tenascin C) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
平臍蠕孢菌TNX (Tenascin X) ELISA Kit 用途: 研究
金黃色葡萄球菌TDG1 (Teratocarcinoma Derived Growth Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Staphylococcus aureus
玻利維亞鹽單胞菌TCC C5b-9 (Terminal Complement Complex C5b-9) ELISA Kit拉丁屬名: Halomonas boliviensis
草生鏈霉菌TIEG1 (TGF-beta-inducible early response gene-1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces pratensis
金頂側(cè)耳、榆黃磨、金頂磨TBP2 (Thioredoxin Binding Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pleurotus citrinopileatus Sing.
葡萄座腔菌TrxR1 (Thioredoxin Reductase 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
適宜劍菌Trx (Thioredoxin) ELISA Kit 拉丁屬名: Ensifer terangae
雞樅(雞菌）TAFI (Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor) ELISA Kit拉丁屬名: Termitomyces eurhizus
雞胚致死孤兒病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)OST-beta 有機(jī)溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白OSTβ抗體氯化兩面針堿2,3-Dimethoxy-12-methyl-[1,3]dioxolo[4',5':4,5]benzo[1,2-c]phenanthridin-12-ium chloride中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H18NO4+.Cl- 分 子 量: 383.82492
AANAT 芳香胺N-乙酰化轉(zhuǎn)移酶抗體拉莫三嗪6-(2,3-Dichlorophenyl)-1,2,4-triazine-3,5-diamine化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C9H7N5Cl2 分 子 量: 256.09138
AT2R2 緊張素Ⅱ受體2抗體尖葉云香堿，吳茱萸素2,3-Butanediol,1-[(4,8-dimethoxyfuro[2,3-b]quinolin-7-yl)oxy]-3-methyl-, (2R)-對(duì)照藥材 分 子 式: C18H21NO6 分 子 量: 347.36244
Influenza A virus (Duck) 鴨病毒抗體牛七堿Aconitane-3,13,14,15-tetrol,8-ethoxy-20-ethyl-1,6,16-trimethoxy-4-(methoxymethyl)-, 3-acetate 14-benzoate,(1a,3a,6a,14a,15a,16b)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C36H51NO11 分 子 量: 673.79024
TNF-alpha -α抗體(1R)-(-)-桃金娘烯醛(-)-Myrtenal化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H14O 分 子 量: 150.21756
AARS2 丙氨酰tRNA合成酶2抗體1,3,7-三羥基-9H-氧雜蒽-9-酮9H-Xanthen-9-one,1,3,7-trihydroxy-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C13H8O5 分 子 量:
TDRD9/HIG1 缺氧誘導(dǎo)蛋白HIG1抗體常春藤皂苷元Hederagenin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H48O4 分 子 量: 472.7
