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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

太平洋大洋桿狀菌DRD4 (Dopamine Receptor D4) ELISA Kit  拉丁屬名: Oceanibaculum pacificum

堅脆嗜熱子囊菌DAT (Dopamine Transporter) ELISA Kit  拉丁屬名: Thermoascus crustaceus

環(huán)狀芽胞桿菌GAPDH (Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase) ELISA kit拉丁屬名: Bacillus  circulans

德氏乳桿菌保加利亞亞種DNM1 (Dynamin 1) ELISA Kit   拉丁屬名: Lactobacillus  delbrueckii subsp. bulgaricus

鮮綠青霉DMD (Dystrophin) ELISA Kit  拉丁屬名: Penicillium  viridicatum

金龜子綠僵菌*SCARB1 (Scavenger receptor class B member 1) ELISA kit拉丁屬名: Metarhizium anisopliae (Metschnikoff) Sorokin

平菇EGR1 (Early Growth Response Protein 1) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

假單胞菌屬EGR2 (Early Growth Response Protein 2) ELISA Kit  拉丁屬名: Pseudomonas avellanae

腐皮鐮孢菌EGR3 (Early Growth Response Protein 3) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

黑曲霉EGR4 (Early Growth Response Protein 4) ELISA Kit   拉丁屬名: Aspergillus niger

毛韌革菌 DKK3 (Dickkopf Related Protein 3) ELISA Kit拉丁屬名: Stereum hirsutum

莫哈韋芽孢桿菌NE (Neutrophil Elastase ) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

枯草芽孢桿菌ELA4 (Elastase 4) ELISA Kit  拉丁屬名: Bacillus  subtilis

刺盤孢屬ELN (Elastin) ELISA Kit  拉丁屬名: Colletotrichum sp.

黃孢平革菌EMILIN1 (Elastin Microfibril Interface Located Protein 1) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
胎兒彎曲桿菌亞種探針法熒光定量PCR試劑盒說明書CD34  CD34(多肽抗原)HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS,pH6.7)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CD56/NCAM1 (Neural Cell Adhesion Molecule 1)  神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1(抗原)羅漢果皂苷IveMogroside IVe中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C54H92O24 分 子 量: 1125.29388

CEAcam8/CD67  癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8TNET緩沖液(1×,pH8.0)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CD68  CD68抗原鹽酸川芎嗪2,3,5,6-Tetramethylpyrazine hydrochloride中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C8H13ClN2 分 子 量: 172.65

CD68  CD68（多肽抗原）4-O-阿魏?？崴?-feruloylquinic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H20O9 分 子 量: 368.335

CD117/c-kit/SCFR  干細(xì)胞生長因子受體/細(xì)胞表面分化抗原（抗原）二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯Columbianadin中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C19H20O5 分 子 量: 328.3591

CD133  造血干細(xì)胞抗原（多肽抗原）紫杉素 BTaxinin B對照藥材 分 子 式:  分 子 量: