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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

樟疫霉ANGPTL2 (Angiopoietin Like Protein 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

擬康寧木霉ANGPTL4 (Angiopoietin Like Protein 4) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

擬青霉ANG-R-Tie1 (Angiopoietin Receptor Tie1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌ANG-R-Tie2 (Angiopoietin Receptor Tie2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas maltophilia

蓋氏海桿狀菌AGT (Angiotensinogen) ELISA Kit拉丁屬名: Marinobacter guineae

帚狀曲霉ANG1 (Angiopoietin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus penicillioides

大腸埃希菌ANG2 (Angiopoietin 2) ELISA Kit拉丁屬名: coli

粘孢白僵菌ANXA5 (Annexin A5) ELISA Kit拉丁屬名: Beauveria velata

黃曲霉ANXA2(Annexin A2) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus flavus Link

棒形青霉α-Fodrin IgG/IgA (anti-alpha-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium claviforme

枯草芽孢桿菌ACA-IgA (anti-Cardiolipin Antibody IgA) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

地衣芽胞桿菌ACA-IgG (anti-Cardiolipin Antibody IgG) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus licheniformis

三線鐮孢ACA-IgM (anti-Cardiolipin Antibody IgM) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium tricinctum

爪哇根霉ACA (anti-Centrol and Centrosome Antibody) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus javanicus Takada

巨大芽孢桿菌 AADH (Antidiuretic Hormone) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
布魯氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書CXCL16 peptide  CXC趨化因子16抗原HEPES溶液(1mol/L,pH6.8-8.0)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

Sema3A (semaphorin 3A)  臂板蛋白3A(多肽)白術(shù)內(nèi)酯IIIAtractylenolide III中藥標準品  分 子 式: C15H20O3 分 子 量: 248.32

Sema3F (semaphorin 3F)  臂板蛋白3F抗原去乙酰基Ophiopojaponin A中藥標準品  分 子 式:  分 子 量:

SFRP1(Secreted frizzled related protein 1)  分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗原6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷6'-O-beta-D-Apiofuranosylsweroside化學標準品 分 子 式:  分 子 量:

SGLT1(sodium-glucose cotransporter1)  鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運載體1抗原氟羅沙星Fleroxacin化學標準品 分 子 式: C17H18N3O3F3 分 子 量: 369.33832

Shadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor)  新朊蛋白/朊蛋白相關(guān)蛋白/沙杜（Shadoo）蛋白抗原甲基赤芝萜酮methyl-對照藥材 分 子 式: C22H34N4O5S2Cl2 分 子 量: 569.56516

Shiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139]  大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體（O139菌型）遠志皂苷DOlean-12-en-28-oicacid, 3-(b-D-glucopyranosyloxy)-2,16,23-trihydroxy-,O-D-apio-b-D-furanosyl-(1®3)-O-b-D-xylopyranosyl-(1®4)-O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®2)-a-L-arabinopyranosyl ester, (2b,3b,4b,16a)-中藥標準品  分 子 式: C57H92O27 分 子 量: 1209.32418