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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
奧葉茲基氏病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3282
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-10
  • 更新日期: 2025-03-21
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3282
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

奧葉茲基氏病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格

Aujeszky's Disease Virus(ADV)

LZR3282

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

阪崎腸桿菌UBD (Ubiquitin D) ELISA Kit拉丁屬名: Enterobacter  sakazakii

黑曲霉DUB (Deubiquitinating Enzyme) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  niger

環(huán)狀芽孢桿菌UBE1L (Ubiquitin Activating Enzyme E1 Like Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus circulans

Rhizobium multihospitiumUBE2C (Ubiquitin Conjugating Enzyme E2C) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

釀酒酵母UBE3A (Ubiquitin Protein Ligase E3A) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

附著孢小隔指孢NNE (Non-Neuronal Enolase) ELISA Kit拉丁屬名: Dactylellina haptospora

綠菇SDC3 (Syndecan 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

雙孢蘑菇TPS (Tryptase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

假單胞菌FBLN5 (Fibulin 5) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

嗜中溫寒冷桿菌DR-70TM (Tumor Marker DR-70 For Lung Cancer) ELISA Kit拉丁屬名: Frigoribacterium  mesophilum

焦曲霉REG1β (Regenerating Islet Derived Protein 1 Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus ustus

綠色木霉SPA (Pulmonary Surfactant Associated Protein A) ELISA Kit 用途: 資源真菌

枯草芽孢桿菌枯草亞種SPB (Pulmonary Surfactant Associated Protein B) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis

Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorumSPC (Pulmonary Surfactant Associated Protein C) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌枯草亞種SPD (Pulmonary Surfactant Associated Protein D) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
奧葉茲基氏病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格MIP-3 beta/ELC/CCL19(Macrophage Inflammatory Protein 3 Beta)  巨噬細(xì)胞炎性蛋白19抗原密力特苷Melittoside化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H32O15 分 子 量: 524.47

CCL26(Eotaxin 3)  嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白3抗原硝酸銀水溶液(10%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CCR-1(CC chemokine receptor 1)  細(xì)胞表面趨化因子受體1抗原澤瀉醇A-24-醋酸酯;Alisol A 24-acetate中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C32H52O6 分 子 量: 532.75168

CCR-3(CC chemokine receptor 3)  CC趨化因子受體3抗原鹽酸納洛酮naloxone hydrochloride化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C19H22NO4+ 分 子 量: 328.38228

CCR-2A(C-C Chemokine receptor 2A)  細(xì)胞表面趨化因子受體2A抗原(+)-丁香樹脂酚Phenol,4,4'-(tetrahydro-1H,3H-furo[3,4-c]furan-1,4-diyl)bis[2,6-dimethoxy-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H26O8 分 子 量: 418.43704

CCR-4(C-C chemokine receptor 4)  細(xì)胞表面趨化因子受體4抗原桑呋喃A2-{2-[(2E)-3,7-dimethylocta-2,6-dien-1-yl]-5-hydroxy-3-methoxyphenyl}-1-benzofuran-6-ol化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C25H28O4 分 子 量: 392.48742

CCR-6/CD196 peptide  細(xì)胞表面趨化因子受體6抗原乙酸雷公藤內(nèi)酯AOlean-12-en-29-oic acid, 3-(acetyloxy)-22-hydroxy-, g-lactone,

(3b,20a,22a)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C32H48O4 分 子 量: 


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