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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3236
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-10
- 更新日期： 2025-03-21
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3236 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
腺病毒B型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商 | Adenovirus(AV) | LZR3236 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
彎孢菌Apo A1-Ab (Anti-Apolipoprotein A1 Antibody) ELISA Kit用途: 研究
枯草芽孢桿菌LCN1 (Lipocalin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
大腸埃希氏桿菌ApoA2 (Apolipoprotein A2) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
茯苓ApoA4 (Apolipoprotein A4) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
熒光假單胞菌ApoB (Apolipoprotein B) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas fluorescens
美澳型核果褐腐病菌ApoC1 (Apolipoprotein C1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
放線纖維菌ApoC2 (Apolipoprotein C2) ELISA Kit拉丁屬名: Actinotalea arctic
藍(lán)色犁頭霉ApoC3 (Apolipoprotein C3) ELISA Kit拉丁屬名: Absidia coerulea
休哈塔假絲酵母ApoC4 (Apolipoprotein C4) ELISA Kit拉丁屬名: Candida shehatae
連香樹迪茲氏菌ApoD (Apolipoprotein D) ELISA Kit 拉丁屬名: Dietzia cercidiphylli
巨大芽孢桿菌ApoE (Apolipoprotein E) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus megaterium
食吡啶紅球菌ApoF (Apolipoprotein F) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhodococcus pyridinivorans
普通青霉ApoH (Apolipoprotein H) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium commune
釀酒酵母ApoM (Apolipoprotein M) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
小牛葡萄球菌CA6 (Carbonic Anhydrase VI) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus vitulinus
腺病毒B型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商Caspase-10 半胱胺酸蛋白酶-10（抗原）黃花香茶菜甲素，黃花甲素，大萼變型甲素Sculponeatin B對(duì)照藥材 分 子 式: C20H26O6 分 子 量: 362.41684
Caspase-13 半胱胺酸蛋白酶蛋白-13（抗原）細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷Tenuifolin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C36H56O12 分 子 量: 680.37
CD19(B-lymphocyte antigen CD19) CD19異連翹酯苷AIsoforsythiaside standard中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C29H36O15 分 子 量: 624.58714
Clenbuterol Hydrochloride/BSA 鹽酸克侖特羅偶聯(lián)牛血清白蛋白BSA瑞香素7,8-Dihydroxycoumarin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C9H6O4 分 子 量: 178.14
Clenbuterol Hydrochloride/KLH 鹽酸克侖特羅偶聯(lián)血藍(lán)蛋白KLH水飛薊賓silymarin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C25H22O10 分 子 量: 482.44
Estradiol/BSA 雌二醇偶聯(lián)牛血清白蛋白辛夷烯酮Denudatone對(duì)照藥材 分 子 式: C15H19NO 分 子 量: 229.31746
DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase)N terminal 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗原（N端）甲基橙皮苷Methylhesperidine中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C29H36O15 分 子 量: 624.59
