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人溶菌酶(hLYZ)轉(zhuǎn)基因成分核酸檢測試劑盒試劑準(zhǔn)備

發(fā)表時(shí)間:2021-10-13
人溶菌酶(hLYZ)轉(zhuǎn)基因成分核酸檢測試劑盒試劑準(zhǔn)備:

1. DNA模板

2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶操作步驟 

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

       引物1(10pM)               2μl

       引物2(10PM)              2μl

       Taq酶(2U/μl)            1μl

      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

      加ddH2O至               50 μl

    視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D抗體
磷酸化腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體
磷酸化自噬相關(guān)蛋白4A抗體
磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體
磷酸化自噬相關(guān)蛋白16A抗體
磷酸化蛋白激酶AKT3抗體
磷酸化腎上腺素能受體β2抗體
磷酸化水通道蛋白2抗體
磷酸化自噬相關(guān)蛋白3抗體
醛縮酶2抗體
胰腺α淀粉酶抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體
磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
醛固酮還原酶家族1成員D1抗體
肝血管生成素相關(guān)蛋白抗體
自水解酶結(jié)構(gòu)域5蛋白抗體
?;o酶A硫酯酶8
溶血磷脂酸?;D(zhuǎn)移酶β抗體
AFP4b蛋白抗體
載脂蛋白C2抗體
載脂蛋白A5抗體
載脂蛋白A2抗體
溶血磷脂酸?;D(zhuǎn)移酶D抗體
載脂蛋白E3抗體
ABI基因家族2抗體
氧化蛋白質(zhì)水解酶





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