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人烏頭酸酶2(ACO-2)酶聯(lián)免疫試劑盒樣本處理及要求
發(fā)表時(shí)間:2021-09-14
人烏頭酸酶2(ACO-2)酶聯(lián)免疫試劑盒樣本處理及要求:
1血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細(xì)胞
293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細(xì)胞系
EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞
HBE, 正常人支氣管上皮細(xì)胞系
HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細(xì)胞
HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系
HUM, 正常人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
HAVSMC, 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
LX-2, 人肝星形細(xì)胞株
3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞
C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞
細(xì)胞名稱
MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人乳腺癌細(xì)胞
MDA-MB-231(ATCC來源), 人乳腺癌細(xì)胞
Raji,人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞
Saos-2,人成骨肉瘤細(xì)胞
Caco-2,人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
NCI-N87 [N87]人胃癌細(xì)胞
MGC80-3(MGC-803)人胃癌細(xì)胞
EC109,人食管癌細(xì)胞
HGC-27人胃癌細(xì)胞
AGS人胃腺癌細(xì)胞
1血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細(xì)胞
293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細(xì)胞系
EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞
HBE, 正常人支氣管上皮細(xì)胞系
HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細(xì)胞
HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系
HUM, 正常人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
HAVSMC, 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
LX-2, 人肝星形細(xì)胞株
3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞
C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞
細(xì)胞名稱
MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人乳腺癌細(xì)胞
MDA-MB-231(ATCC來源), 人乳腺癌細(xì)胞
Raji,人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞
Saos-2,人成骨肉瘤細(xì)胞
Caco-2,人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
NCI-N87 [N87]人胃癌細(xì)胞
MGC80-3(MGC-803)人胃癌細(xì)胞
EC109,人食管癌細(xì)胞
HGC-27人胃癌細(xì)胞
AGS人胃腺癌細(xì)胞